免疫熒光技術(shù)
免疫熒光技術(shù)是用熒光素標記的抗體檢測抗原或抗體的免疫學(xué)標記技術(shù),又稱(chēng)熒光抗體技術(shù)。所用的熒光素標記抗體通稱(chēng)為熒光抗體,系由熒光素(常用異硫氰基熒光黃,F1TC)以化學(xué)方法與效價(jià)較高、活性較強的抗體共價(jià)結合后制備而成。免疫熒光技術(shù)在實(shí)際應用上主要有直接過(guò)和間接法。
免疫測定法的代表技術(shù)是ELISA技術(shù),是抗原或抗體吸附到固相載體上作為一種試劑來(lái)檢測標本中有無(wú)相應的抗體或抗原的一種方法。根據反應原理,加入某種酶標記的抗體或抗原,洗滌除去未結合物,加入該酶的底物,酶催化底物生成有色產(chǎn)物,產(chǎn)物的量與標本中受檢物的量有關(guān),根據反應顏色的深淺可定量測定。EIA在微生物學(xué)領(lǐng)域中可用于病原的檢測、抗體檢測和細菌代謝產(chǎn)物的檢測。EIA具有高度的特異性和敏感性,幾乎所有可溶性的抗體抗原反應系統均可檢測,最小可測值能夠達到ng甚至pg水平。與放射免疫方法相比較,EIA的標記試劑較穩定,且無(wú)放射性危害;與免疫熒光技術(shù)相比,EIA敏感性高,不需特殊設備,結果觀(guān)察簡(jiǎn)便。酶免疫技術(shù)發(fā)展較晚,但隨著(zhù)試劑的商品化以及自動(dòng)化操作儀器的廣泛使用,己使酶免疫技術(shù)日趨成熟,方法穩定,結果可靠,在很多領(lǐng)域取代了熒光技術(shù)和放射免疫測定法。
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