霍亂弧菌——流行病學(xué)分型技術(shù)

    霍亂弧菌（V.cholerae）污染食品，可引起食源性疾病的暴發(fā)。主要表現為劇 烈的嘔吐，腹瀉，失水，死亡率甚高。屬于國際檢疫傳染病。

    流行病學(xué)分型技術(shù)： 

    生物型的鑒別

    第Ⅳ組噬菌體（106/毫升）裂解試驗：第Ⅳ組霍亂噬菌體常規稀釋液（106/毫升）一般只裂解霍亂弧菌古典型，而不裂解埃爾托型（有少數例外）。第Ⅳ組霍亂噬菌體原液（109/毫升）對古典型、埃爾托型均能裂解。 

    多粘菌素B敏感試驗：在冷卻至約50℃的普通瓊脂中加入多粘菌素B（50單位/毫升），混合后制成平板。然后將2-3小時(shí)的菌培養物一環(huán)接種在平板。然后將2-3小時(shí)的菌培養物一環(huán)接種在平板表面，待干后置37℃培養過(guò)夜，觀(guān)察結果。古典型敏感（不生長(cháng)或生長(cháng)不足10個(gè)菌落），埃爾托不敏感（多粘菌株形成菌苔）。也可用多粘菌素B紙片（50單位）按藥敏感試驗方法進(jìn)行。

    雞血球凝集試驗：加一滴生理鹽水于玻片上，挑取被檢菌培養物于鹽水中制成濃厚的菌懸液，取一滴2.5%雞血球懸液混于菌懸液中,搖勻,一分鐘內出現血球凝集者為陽(yáng)性,血球呈均勻分散狀態(tài)為陰性。埃爾托型為陽(yáng)性，古典型一般為陰性。

    VP試驗：將被檢菌接種于葡萄糖磷酸鹽蛋白胨水中，于37℃培養2-3天后，取出１毫升加5％α－奈酚酒精溶液0.6毫升，震蕩5秒鐘，再加入40％氫氧化鉀0.2毫升，再震蕩5秒鐘，于室溫中放置2-5分鐘，1小時(shí)內出現紅色者為陽(yáng)性。古典型為陰性，埃爾托型多為陽(yáng)性。
    噬菌體、生物分型：為區別埃爾托型的兩類(lèi)不同菌株（流行株與非流行株）和不同菌型，對不同來(lái)源的菌株進(jìn)行分型，可追溯病原的來(lái)源。

    噬菌體分型：根據5株噬菌體（VP1-VP5）可將埃爾托弧菌分成32個(gè)噬菌體型，常見(jiàn)的流行株為噬菌體1型（對5株噬菌體型全敏感）、3～5型，2型主要是1型的粗糙型，6型以后屬非流行株。
    埃爾托弧菌生物分型：根據菌株的溶原性、對溶原噬菌體的敏感性、山梨醇發(fā)酵和溶血試驗等生物學(xué)性狀可將埃爾托弧菌分成12個(gè)生物型。

    噬菌體－生物分型：將噬菌體分型與生物分型結合起來(lái)，每個(gè)噬菌體又可分為幾個(gè)生物型，即噬菌體－生物分型，如1ａ、1ｂ、8ｉ等。常見(jiàn)的流行株為噬菌體1～3型，生物型為ａ～ｄ，非流行株為噬菌體6～32型，生物型為ｇ～ｌ。通過(guò)噬菌體－生物分型，可以了解該地區菌型組成和分布情況。

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