致病性副溶血性弧菌的檢測——核酸分子雜交法

核酸分子雜交法

(1) 耐熱直接溶血素基因(tdh)探針:1992 年 ,Lee 等 建立了1 種檢測副溶血性弧菌 tdh 的基因探針?lè )椒?,試驗結果表明 ,該探針可特異地與 89 株副溶血性弧菌分離株的DNA雜交 ,對其他弧菌或其他腸道、非腸道菌(n =48) 不反應。利用該探針可直接檢測人工染菌的食品 ,無(wú)需進(jìn)行增菌分離。

(2) 耐熱直接溶血素相關(guān)毒素基因(trh) 探針:2006年 ,Raghunath 等 用堿性磷酸酶標記的針對trh的寡聚核苷酸探針 ,檢測海產(chǎn)品中 trh⁺ 的副溶血性弧菌。結果表明 ,trh探針的特異性為 100%、靈敏度為 (510 ×10 ～314 ×10 cfu/g),反應時(shí)間為 1h,該探針可特異、靈敏地檢測海產(chǎn)品中 trh⁺ 的副溶血性弧菌。

(3) 不耐熱溶血素基因( tlh ) 探針:McCarthy 等應用堿性磷酸酶(AP)標記的基因探針檢測副溶血性弧菌的tlh。在124 株試驗株中 ,AP標記的探針僅對26 株副溶血性弧菌雜交 ,而對 88 株其他弧菌和 l0 株非弧菌細菌均不雜交 ,應用該探針和API20E鑒定系統檢測了從牡蠣中分離的 206 株疑似副溶血性弧菌 ,兩者檢測結果97%相同。

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