菊花花瓣培養

    菊花莖尖培養是在適宜的條件下，大多經(jīng)培養直接誘導產(chǎn)生植株。而花瓣培養則要去分化，先形成愈傷組織，從愈傷組織再分化產(chǎn)生完整的植株，有的則可產(chǎn)生胚狀體而長(cháng)成完整植株。由于在培養中需經(jīng)過(guò)愈傷組織途徑，有去分化和再分化的過(guò)程，因而由花瓣培養產(chǎn)生的植株往往有變異產(chǎn)生，表現在植株、葉形、花色、花形等多方面變異，如小苗葉片的葉形、厚薄、缺刻深淺變化。光周期性變化，從短日性變?yōu)橹腥招�。株型、花色、花型、瓣型等變化，所以花瓣培養可用來(lái)進(jìn)行菊花新品種的繁育。且其與雜交育種和輻射育種相比，有節省設備和人力、簡(jiǎn)便易行、機遇高等優(yōu)點(diǎn)。此外花瓣植株是通過(guò)愈傷組織途徑產(chǎn)生的，不帶病毒，所以對沒(méi)有產(chǎn)生變異類(lèi)型的菊花來(lái)講，也可起到復壯提高種性的作用，故花瓣植株表現也生長(cháng)健壯，花大而艷麗。

    1)菊花花瓣培養的方法 

取菊花開(kāi)花前2～3天已露白的花蕾，整個(gè)剪下，在自來(lái)水下沖洗十幾min，然后在無(wú)菌條件下，用75%的酒精浸泡10～15min進(jìn)行表面滅菌，后用無(wú)菌水沖冼兩次，再用10%的漂白粉澄清液浸泡20min，再用無(wú)菌水沖洗3～4次。然后用無(wú)菌濾紙吸干水分， 

接種　用剪刀取舌狀花，再用解剖刀切取舌狀花約5mm見(jiàn)方大小，接種到MS基本培養基上，添加BA 1～3mg/l， NAA0.5～2mg/l。 

培養條件：接種后置于溫度25℃左右，光照強度2000lx，每天照光12小時(shí)的條件下培養。 

培養過(guò)程：花瓣培養10天左右，開(kāi)始產(chǎn)生愈傷組織，成一圓塊狀，色淡黃至嫩綠， 

胚狀體培養　培養20～30天后，從愈傷組織分化產(chǎn)生根系，以后又分化出芽點(diǎn)，但不成軸狀結構。有些品種在愈傷組織生長(cháng)30天左右，表面可出現大量綠色圓粒狀物，用放大鏡可觀(guān)察到似魚(yú)卵群集，即分化形成了胚狀體，這是花瓣體細胞產(chǎn)生的，故為無(wú)性胚，數量大、成苗多。生長(cháng)到40～50天后則可見(jiàn)到大量的芽生長(cháng)產(chǎn)生。 

再分化培養　有些愈傷組織還需轉移到分化培養基，才能誘導分化得到花瓣苗。分化培養基在原來(lái)誘導基礎上，降低其中的生長(cháng)素濃度或提高細胞分裂素的濃度。配制好分化培養基，將愈傷組織切成約5mm大小接入，約20～30天培養，又可分化出植株。 

生根培養　最后需轉移生根培養基，當芽高具3～4片葉時(shí)，移入NAA0.3mg/l的MS培養基中，約經(jīng)2周培養，產(chǎn)生數條根系，即可得到完整的試管花瓣植株。 

菊花無(wú)病毒苗的培養 

    菊花為多年生宿根無(wú)性繁殖作物，常年靠分離母體的一部進(jìn)行繁殖，因此病毒代代相傳，在母體中逐代積累，濃度越來(lái)越高，影響植株的生長(cháng)趨勢、花形、花色、花的大小和產(chǎn)花量，過(guò)去一直沒(méi)有較有效的方法克服，現在證明用組織培養的方法可根除或減緩病毒的影響。 

    危害菊花的病毒有：①菊花斑紋病毒,造成葉上有輕斑紋，葉脈透明，花瓣上也有斑紋。②菊花矮縮類(lèi)病毒，受害株比正常株矮1/2～2/3，葉有黃色斑點(diǎn)或成帶狀，花小，開(kāi)花早。③菊花輕斑駁病毒，葉有輕微斑紋，花褪色，也有斑。④蕃茄不孕病毒,葉片大多無(wú)病癥,表現花形小，花瓣生長(cháng)不整齊，有萎蔫現象。此外還有畸花病毒、綠花病毒、褪綠斑駁病毒、花葉病毒等。 

    1)莖尖培養脫毒 

切取頂芽或腋芽3～5cm，去掉展開(kāi)的葉，只留護芽的嫩芽。先用自來(lái)水沖冼，用0.1%升汞或飽和漂白粉上清液對材料進(jìn)行表面滅菌，再用無(wú)菌水涮冼數次。在雙筒解剖鏡下剝離生長(cháng)點(diǎn)，分離到0.5mm以下，一般帶2個(gè)葉原基。分離出的莖尖，生長(cháng)點(diǎn)朝上，迅速接種或放置滅菌水表面，以防莖尖脫水。 

菊花無(wú)病毒可用指示植物鑒定法、抗血清鑒定法、電鏡檢視法等檢測。如果檢測時(shí)仍有病毒存在，就應淘汰該植株。如果已證明脫除了主要危害的病毒，只要取得一株無(wú)毒苗即可繁殖大量的無(wú)毒種苗。這樣經(jīng)嚴格鑒定的去毒苗，稱(chēng)為原原種，原原種種源應保存在試管里和有隔離條件和消毒制度的保護區域里栽培，以防止再度遭到病毒的侵襲。由原原種繁殖產(chǎn)生的植株稱(chēng)為原種。在有試管繁殖的條件下，可以年年栽培原種種苗，保證無(wú)病毒的影響。 

   2)熱處理脫毒 

菊花也可采用熱處理方法來(lái)進(jìn)行脫毒，在35～36℃的條件下栽培兩個(gè)月，可以達到脫毒的效果。但是熱處理只能除去菊花矮縮類(lèi)病毒和蕃茄不孕病毒，而不能除去菊花輕斑駁病毒和褪色斑駁病毒，后者只有通過(guò)莖尖培養途徑脫毒來(lái)達到目的。

上一篇：草莓組織培養

下一篇：菊花的組培快速繁殖