選擇性培養基(selectedmedium) 選擇性培養基就是根據某種微生物的特殊營(yíng)養要求或其對某化學(xué)、物理因素的抗性而設計的培養基,其功能是使混合菌樣中的劣勢菌變成優(yōu)勢菌,從而提高該菌的篩選效率。這種培養基是在上世紀末由荷蘭的M.W.Beijerinck和俄國的S.N.Vinogradsky發(fā)明的。我國勞動(dòng)人民在12世紀(宋代)時(shí),已根據紅曲霉有耐酸和耐高溫的特性,采用了明礬來(lái)調節酸度和用酸米來(lái)抑制雜菌的方法,培養出純度很高的紅曲,這實(shí)際上就是一種選擇性培養基。
混合樣品中數量很少的某種微生物,如直接采用平板劃線(xiàn)或稀釋法進(jìn)行分離,必難以奏效。這時(shí),第一種辦法可利用該分離對象對某一營(yíng)養物質(zhì)有一“嗜好”的原理,專(zhuān)門(mén)在培養基中加入該營(yíng)養物,從而使它成為一種加富培養基(enrichedmedium)。采用這類(lèi)“投其所好”的策略即可使該微生物大大增殖,在數量上超過(guò)原有占優(yōu)勢的微生物,以達到富集培養的目的。第二種辦法則可利用該分離對象對某種制菌物質(zhì)的抗性,在混合培養物中加入該抑制物質(zhì),經(jīng)培養后,由于原來(lái)占優(yōu)勢的它種微生物的生長(cháng)受到抑制,而分離對象卻可趁機大大增殖,使之在數量上占據優(yōu)勢。通過(guò)這種“取其所抗”的辦法,也可達到富集培養的目的。
用于加富的營(yíng)養物主要是一些特殊的碳源和氮源,如纖維素可被用來(lái)富集纖維素分解微生物,甘露醇用來(lái)富集自生固氮菌,石蠟油用來(lái)富集分解石油的微生物,以及用較濃的糖液來(lái)富集酵母菌,等等。
用于抑制它種微生物的選擇性抑制劑有染料(結晶紫等)、抗生素和脫氧膽酸鈉等(見(jiàn)表5-19);有利于選擇培養的理化因素有溫度、氧氣、pH或滲透壓等。
常用的選擇性培養基幾乎都同時(shí)利用了以上的“投其所好”和“取其所抗”兩種原理。具體例子如:
(1)酵母富集培養基 葡萄糖5%,尿素0.1%,(NH4)2SO4 0.1%,KH2PO4 0.25%,Na2HPO4 0.05%,MgSO4·7H2O 0.1%,FeSO4·7H2O 0.01%,酵母膏0.05%,孟加拉紅1/3萬(wàn),pH=4.5
(2)Ashby無(wú)氮培養基(富集自生固氮菌用)甘露醇1%,KH2PO4 0.02%,MgSO4·7H2O 0.02%,NaCl 0.02%,CaSO4·2H2O 0.01%,CaCO3 0.5%
(3)Martin培養基(富集土壤真菌用)葡萄糖1%,蛋白胨0.5%,KH2PO4 0.1%,MgSO4·7H2O 0.05%,瓊脂2%,孟加拉紅1/3萬(wàn),鏈霉素30μg/ml,金霉素2μg/ml
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