植物組織培養離體葉培養

    離體葉培養包括葉原基、葉柄、葉鞘、葉片、子葉在內的葉組織的無(wú)菌培養。它大多經(jīng)脫分化形成愈傷組織，再經(jīng)再分化生出不定芽和不定根。 

應用：不僅可用于研究形態(tài)建成、光合作用、葉綠素形成等理論問(wèn)題，而且也是繁殖稀有名貴品種的有效手段。 

葉培養特點(diǎn)：材料來(lái)源廣泛，數量大，容易培養，尤其對木本植物，生成的愈傷組織完整，數量多，較迅速等。 

葉片再生能力： 以羊齒植物最多，雙子葉植物次之，單子葉植物最少。 

再生方式：一種是直接誘導形成不定芽，另一種是先誘導形成愈傷組織，再經(jīng)愈傷組織分化成植株，葉的離體培養技術(shù)如下： 

    １．材料選擇及滅菌  選擇健康潔凈的植株，取其較幼嫩葉片，沖洗干凈，用70%酒精漂洗約10秒，再在飽和漂白粉液中浸3～15分鐘，或在0.1%升汞中浸3～5分鐘，以前者為佳。用無(wú)菌水沖洗數次，再放在無(wú)菌的干濾紙上吸干水分，以供接種用。對一些粗糙或帶茸毛的葉片要延長(cháng)滅菌時(shí)間。注意要選擇成熟的葉片。 

２．接種  將葉片切成約0.5cm見(jiàn)方小塊或圓片及薄片（如葉柄和子葉），注意選擇切塊位置。MS培養基附加BA　1～3，NAA0.25～1。 

３．培養  培養條件為每天10～12小時(shí)光照，光強1500～3000Lx。 

1）培養2－4周，葉切塊開(kāi)始增厚腫大，進(jìn)而形成愈傷組織。2）轉移到分化培養基上進(jìn)行培養，其培養基的BA含量為2左右，約再過(guò)10天左右，愈傷組織開(kāi)始轉綠出現綠色芽點(diǎn)，形成不定芽。通過(guò)繼代培養和生根培養，完成整個(gè)組培過(guò)程。 

葉的培養比胚，莖尖和莖段培養難度大。首先要選用易培養成功的葉組織，如幼葉比成熟葉易培養，子葉比葉片易培養。其次要添加適當的生長(cháng)素和細胞分裂素濃度，保證利于葉組織的脫分化和再分化。

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