(1)間接ELISA(1ELISA)
我國現已建立了間接ELISA方法，但目前應用還較少。間接ELISA試驗中，多是以光滑型脂多糖(sLPS)作為抗原的，這些方法大多已通過(guò)田間試驗并得到了驗證，并正在被廣泛應用。lELISA高度敏感，但不能鑒別牛種布氏桿菌19號疫苗接種所產(chǎn)生的抗體。不同的間接ELISA試驗程序都比較相似，脂多糖抗原包被ELISA板，PBST洗滌后加入待檢血清，再依次加入酶標二抗、底物和終止液，用酶標儀測光密度值并判定結果。ELISA常用反應率來(lái)判定結果，即樣品OD值／陽(yáng)性對照OD值×100％。
間接ELISA在檢測感染牛時(shí)其敏感性等于或大于BBAT，在檢測未免疫的牛時(shí)其特異性與CFT相同。根據所設定的臨界值不同，在檢測免疫牛時(shí)其特異性可能會(huì )低于CFT。
(2)競爭ELISA
我國目前還未見(jiàn)有布氏桿菌病競爭ELISA試驗的報道。該方法應用了單克隆抗體，其特異性明顯高于間接ELISA。競爭ELISA可以排除牛種布氏桿菌19號疫苗所產(chǎn)生抗體的影響。其試驗程序首先為包被脂多糖抗原，PBST洗滌后加入單克隆抗體(M84)，再立即加入待檢血清，溫育后再加入酶標羊抗鼠IgG，然后依次加入底物和終止液，用酶標儀測光密度值并判定結果。其結果常采用反應率來(lái)判定。
競爭ELISA在檢測感染牛時(shí)其敏感性等于或大于凝集試驗，與間接ELISA相當。在檢測未免疫牛時(shí)，其特異性等于或大于CFT和間接ELISA。在檢測牛種布氏桿菌”號近期免疫牛時(shí)，其特異性會(huì )低一些．但在檢測過(guò)往免疫動(dòng)物時(shí)，其特異性要顯著(zhù)升高。
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