植物組培莖段培養

   概念：指不帶芽和帶1個(gè)以上定芽或不定芽的，包括塊莖、球莖在內的幼莖切段的無(wú)菌培養。

培養目的：快速繁殖。也可研究莖細胞的生理，以及篩選突變體育種。

    快繁優(yōu)點(diǎn)： 培養技術(shù)簡(jiǎn)單易行，繁殖速度較快；芽生芽方式增殖的苗木質(zhì)量好，且無(wú)病，性狀均一；解決不能用種子繁殖植物的快速繁殖問(wèn)題等。

1．材料選擇和處理  

取生長(cháng)健壯無(wú)病蟲(chóng)的幼嫩枝條或鱗莖盤(pán)，木本則取當年生嫩枝或一年生枝條,剪去葉片，剪成3～4cm的小段。

注意：1）盡力取頂部莖切段和頂芽，但由于頂芽少可利用腋芽，但盡力用莖上部的腋芽。2）盡量在生長(cháng)期取芽，休眠期成活率降低。如蘋(píng)果在3～6月取材的成活率為60%，7～11月下降到10%，12～2月都在10%以下。

在自來(lái)水中沖洗1～3小時(shí)，用75%酒精滅菌30～60秒，再用0.1%升汞浸泡3～8分鐘，或用飽和漂白粉浸泡10～20分鐘，因材料老嫩和蠟質(zhì)多少而定時(shí)間。最后用無(wú)菌水沖洗數次，以備接種。

2．培養選MS培養基，加入3%蔗糖，用0.7%的瓊脂固化。培養條件保持25℃左右，給予充分的光照和光期。

培養物的變化：1）基部切口上長(cháng)出愈傷組織，呈現稍許增大，控制不要過(guò)大。2）而芽開(kāi)始長(cháng)長(cháng)，有時(shí)會(huì )出現叢生芽，培養方式或是培養出芽梢或是培養芽叢，從而得到無(wú)菌苗。

    培養基：促進(jìn)腋芽增殖用6-BA是最為有效的，依次為Kt和Zt等。生長(cháng)素雖不能促進(jìn)腋芽增殖，但可改善苗的生長(cháng)，也要適量加入。GA對芽伸長(cháng)有促進(jìn)作用。

   繼代擴繁：包括二種途徑，一是促進(jìn)腋芽的快速生長(cháng)，二是誘導形成大量不定芽。第一種途徑的好處是不會(huì )產(chǎn)生變異，能保持品種優(yōu)良特性。且方法簡(jiǎn)便，可在各種植物上使用，每年從一個(gè)芽可增殖10萬(wàn)株以上。第二種途徑雖會(huì )產(chǎn)生變異，繁殖系數較高，適于多數植物。

    生根培養和移栽馴化與莖尖培養相似，不再重復。

同樣注意馴化管理。要進(jìn)行煉苗，小心移栽，初期濕度要大，基質(zhì)通氣濕潤，保濕保溫，特別要精心管理等。

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