離體根培養特點(diǎn):因為根系生長(cháng)快,代謝強,變異小,加上無(wú)菌,不受微生物干擾,可根據研究需要,改變培養的成分來(lái)研究其營(yíng)養吸收、生長(cháng)和代謝的變化。
應用:研究根系生理和代謝優(yōu)良;也可由根細胞可再生成植株,不僅證明根細胞的全能性,也產(chǎn)生了無(wú)性繁殖系,用于生產(chǎn)實(shí)踐。
培養方法:
1.培養基 用無(wú)機離子濃度低的White培養基,也可用MS、B5等,但濃度為2/3或1/2。
White培養基配方為:硝酸鉀80,硫酸鎂720,硫酸錳7,硫酸銅0.03,碘化鉀0.75,Vpp0.5,VB6 0.1,VB1 0.1,甘氨酸3(mg/L)
2.無(wú)性系的建立和培養、應用
1)將種子進(jìn)行表面消毒,在無(wú)菌條件下用濕布培養萌發(fā),至根伸長(cháng)1.0cm以上。
2)從根尖一端切取長(cháng)1.2cm的尖,接種于培養基中。用分化培養基。
3)培養物生長(cháng)甚快,幾天后發(fā)育出側根。待側根生長(cháng)約一周后,即切取側根的根尖進(jìn)行接種培養,如此反復,得到離體根的無(wú)性系。
4)這種根可用來(lái)進(jìn)行根系生理生化和代謝方面的實(shí)驗研究。如營(yíng)養選擇吸收、根尖伸長(cháng)生長(cháng)、生長(cháng)素對伸長(cháng)的影響等
5)培養條件為暗光、25~27℃。
3.植株再生培養 第一步誘導形成愈傷組織。第二步在再分化培養基上誘導芽的分化、再分化成小植株。
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