臨床實(shí)驗室生物安全柜的選型及使用注意事項

1、生物安全柜的分級及功能

生物安全柜分為Ⅰ級（BSL-1）、Ⅱ級（BSL-2）和Ⅲ級（BSL-3）生物安全柜；BSL-2級生物安全柜又分為A型、B型、B2型、B3型。

生物安全柜其功能如下：BSL-1級生物安全柜可提供人員和環(huán)境的保護，但不提供對樣本的保護，常被用作特殊的密封設備（如離心），或可能產(chǎn)生氣溶膠的操作過(guò)程。BSL-2級生物安全柜可提供人員、環(huán)境和樣本的保護，其中B2型為全排風(fēng)式生物安全柜，沒(méi)有空氣在安全柜內循環(huán)，可同時(shí)提供基本的生物和化學(xué)防護。BSL-3級生物安全柜可提供人員、環(huán)境和樣本的最大保護，用于操作四級生物安全水平的微生物或病原體。

2、生物安全柜的正確選型

實(shí)驗室選擇生物安全柜時(shí)應詳細了解從事傳染性微生物工作中的生物安全級別所包括的主要要素，根據給個(gè)人、環(huán)境、社會(huì )提供的保護情況選取不同級別的生物安全柜。

2.1生物安全一級（BSL-1）：適合用于非常熟悉的病源，該病源不會(huì )經(jīng)常引發(fā)健康成人疾病，對實(shí)驗人員和環(huán)境潛在危險小，實(shí)驗室沒(méi)有必要和建筑物中的一般行走區分開(kāi)，一般按照標準的分級生物操作在開(kāi)放的實(shí)驗室臺面上開(kāi)展工作。不要求一般也不使用特殊的抑制設備和設施（生物安全柜）。

2.2 生物安全二級（BSL-2）：適合于對人和環(huán)境有中度潛在危險的病源。與BSL-1的區別在于：①實(shí)驗人員均應接受過(guò)病源處理方面的特殊培訓，并由有資格的工作者指導。②進(jìn)行實(shí)驗時(shí)限制進(jìn)入實(shí)驗室。③對于污染的銳器應特別注意。④某些可能產(chǎn)生傳染性氣溶膠或飛濺物的過(guò)程應在生物安全柜中或其他物力抑制設備中進(jìn)行，可選用Ⅰ、Ⅱ級生物安全柜。

2.3 生物安全三級（BSL-3）：應用于臨床、診斷、教學(xué)、研究或者生產(chǎn)設施，在該級別中開(kāi)展有關(guān)內源性和外源性病原的工作。若因暴露而吸入該病原會(huì )引發(fā)嚴重的可能致死的疾病。實(shí)驗人員應在處理致病性的可能使人致死的病原方面受過(guò)專(zhuān)業(yè)訓練，并由對該病原工作有經(jīng)驗的有資格的科學(xué)工作者監督。所有與傳染源操作有關(guān)的步驟都在生物安全柜或其他物理抑制裝置中進(jìn)行，最好選用二級或二級以上生物安全柜，實(shí)驗室需要特殊設計和施工，室內為負壓。

2.4 生物安全四級（BSL-4）應用于對生命有高度危險的危險性病原或外源性病原�？赏ㄟ^(guò)氣溶膠而致實(shí)驗室感染或未知傳染風(fēng)險，且引起致命的有關(guān)病原，應選用三級生物安全柜及正壓防護服，如SARS病毒對人或環(huán)境具有中度潛在危險，對攜帶該病毒的患者樣本處理均應在生物安全二級（BSL-2 ）或二級以上實(shí)驗室中進(jìn)行，為了對操作人員和環(huán)境及樣品均提供有效的保護，實(shí)驗室應選用二級以上或全排風(fēng)式生物安全柜（B2型）。

3、生物安全柜使用中應注意的問(wèn)題

3.1對人員的管理

3.1.1 只有經(jīng)過(guò)培訓和指導的實(shí)驗室工作人員才能操作該設備，未經(jīng)培訓人員一律不能使用。

3.1.2 禁止非工作人員進(jìn)入實(shí)驗室，禁止工作人員在操作設備時(shí)吸煙以及處理隱性眼鏡等。

3.1.3 工作人員操作完成后應如實(shí)填寫(xiě)《使用記錄》。

3.2 對設備的管理

3.2.1 對生物安全柜采用單獨供電，以免其他設備發(fā)生意外導致生物安全柜失效。

3.2.2 設備頂部通風(fēng)口不能被任何東西覆蓋以保證排氣通暢。

3.2.3 設備出現報警時(shí)應停止使用，查明原因確保安全后再使用。如出現系統失效的訊號時(shí)，因空氣不能被有效的過(guò)濾而不能繼續使用該設備進(jìn)行操作。

3.2.4 更換空氣過(guò)濾器時(shí)應與廠(chǎng)家工程師聯(lián)系，并進(jìn)行更換，實(shí)驗室工作人員不能私自進(jìn)行更換，以免操作不當造成對周?chē)�人員和環(huán)境的污染。

3.2.5 用過(guò)的過(guò)濾器必須放在密閉的容器中，并在明確的位置注明其可能含有危險的微生物，引起注意并進(jìn)行特殊處理。

3.2.6新購置的生物安全柜在使用之前或維護重新移位以后必須由專(zhuān)業(yè)技術(shù)人員對生物安全柜的整體性能進(jìn)行認證，每臺生物安全柜應該至少每年進(jìn)行一次測試和認證，以確保操作的安全。

3.2.7 生物安全柜性能測試應包括：送風(fēng)氣流的速度和送風(fēng)量的測試，進(jìn)口處進(jìn)風(fēng)速度測試，氣流煙霧流型試驗，空氣過(guò)濾器滲透試驗，安全柜泄露試驗，電器漏電和接地電阻及極性試驗，光照強度試驗，振動(dòng)試驗，噪音水平試驗，紫外線(xiàn)燈測試等。

3.3 工作前的準備

3.3.1 在開(kāi)始工作前要讓生物安全柜封機至少運行3-5分鐘，使安全柜內的空氣進(jìn)行凈化。

3.3.2 安全柜的工作臺面、內壁和觀(guān)察窗的內表面用消毒劑擦拭，再用無(wú)菌蒸餾水進(jìn)行擦拭，以清除殘余的消毒劑。

3.3.3 放到生物安全柜內的容器和材料的表面應以75%的酒精擦拭，以減少將環(huán)境的雜菌帶到安全柜內。

4、操作中的注意事項

4.1 操作人員必須做好個(gè)人防護后才能進(jìn)行生物安全柜的操作。

4.2 操作者先把手臂放入生物安全柜內大約一分鐘，才能進(jìn)行實(shí)驗操作，這樣可以使安全柜穩定并且能讓氣流清掃掉手臂表面的微生物污染。

4.3 所有的操作應該在距離前面的格柵四英寸里面的工作臺面上進(jìn)行，前面的格柵不能被任何物品阻擋。

4.4 所有的材料應該放在距離安全柜前面的格柵和后面工作臺面邊緣盡可能遠的位置，容易產(chǎn)生氣溶膠的設備（如攪拌器、離心機等），應該靠近安全柜的后部放置。

4.5 操作時(shí)的動(dòng)作應該從工作臺面的清潔區到污染區，一般是從左側到右側（習慣于左手操作的人員相反）。

4.6 在生物安全柜內如發(fā)生少量的噴灑時(shí)，應用污染清除吸收紙巾立即進(jìn)行處理，并將使用過(guò)的紙巾放到生物危害包里，再用浸泡消毒液的毛巾立即進(jìn)行擦拭消毒，如發(fā)生大量的溢出時(shí)，要求廣泛的消毒，安全柜內的所有物品應該進(jìn)行表面消毒，并拿出安全柜，使用消毒液的作用時(shí)間應維持在20-30分鐘。

4.7 生物安全柜內禁止使用酒精燈，使用酒精燈進(jìn)行消毒接種工具容易發(fā)生危險，應使用電子高溫滅菌設備。

4.8工作完成時(shí)所有容器和設備應進(jìn)行表面消毒并拿出安全柜，對安全柜的臺面、邊緣、后壁和觀(guān)察窗內側進(jìn)行擦拭、消毒。

4.9 工作人員離開(kāi)實(shí)驗室應摘下手套、脫下工作服并進(jìn)行洗手。

總之：臨床實(shí)驗室（包括HIV實(shí)驗室）是一個(gè)對人類(lèi)具有一定危險的工作場(chǎng)所，保護臨床實(shí)驗室的安全和人員健康是防止環(huán)境污染的第一步和首要工作。生物安全包括生物安全設施、生物安全設備、良好的病原微生物學(xué)操作以及嚴格的管理，而實(shí)驗室生物安全設備的投入是其中不可缺少的一個(gè)環(huán)節，了解生物安全級別及其相關(guān)知識，正確選擇生物安全柜及明確操作中的注意事項對于實(shí)驗室做好安全防護工作保護工作人員的安全和健康，具有重要意義。

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