細菌的鞭毛染色

許多細菌自細胞內長(cháng)出一至許多根細絲狀附屬物稱(chēng)為鞭毛。鞭毛是細菌的運動(dòng)器官，有鞭毛的細菌均可運動(dòng)。鞭毛細長(cháng)透明，其寬度在普通光學(xué)顯微鏡波長(cháng)檢驗范圍之外，所以不易觀(guān)察。但是在不染色情況下可以檢測到細菌的運動(dòng)推斷鞭毛的存在。
【實(shí)驗目的】
學(xué)習并掌握鞭毛染色的原理和方法。
【實(shí)驗原理】
細菌的鞭毛非常纖細，直徑一般在20nm左右，用電鏡才能觀(guān)察。本實(shí)驗采用特殊染色法，即在染色前先經(jīng)媒染劑處理，媒染劑吸附在鞭毛上，使鞭毛加粗，便可達到普通光學(xué)顯微鏡的辨析范圍以?xún)�。染色后，即可利用普通光學(xué)顯微鏡進(jìn)行觀(guān)察。
【實(shí)驗材料、藥品及器具】
1、菌種 培養18-24h的菌種
大腸桿菌（Escherichia coli）
普通變形桿菌（Proteus Vulgaris）
熒光極毛桿菌（Pseudomonas fluorescens）
2、染色液 鞭毛染色液甲
鞭毛染色液乙（實(shí)驗前配好的新鮮染液）
3、器皿 顯微鏡、酒精燈、洗瓶裝蒸餾水、香柏油、二甲苯、擦鏡紙、吸水紙、干凈載玻片、玻璃缸、無(wú)菌水三管、滅菌長(cháng)滴管三支。
【實(shí)驗步驟】
1、用長(cháng)滴管取無(wú)菌水輕輕移入長(cháng)好菌種的試管內，培育20-30min使細菌自己慢慢游入水中并充分舒展其鞭毛，使水呈輕度混濁。
2、取一滴菌懸液滴于玻片的1/3位置上，然后輕輕抬起此端，使懸液緩慢流至玻片另一端，平放使其在空氣中自然干燥固定。切忌用火焰烘干。
3、在涂片部位滴甲液，染色3~5min。
4、用蒸餾水輕輕沖洗。
5、加乙液染30~60s，可在酒精燈上稍稍加熱。沖洗多余的染液。
6、制片干后檢查。
【實(shí)驗結果】
1、顯微鏡下檢查鞭毛染成什么顏色和形狀。
2、比較菌種鞭毛著(zhù)生的位置、數目并繪圖。
【思考題】
１、菌種的培養時(shí)間與鞭毛染色有什么關(guān)系？
２、你在顯微鏡下看到的鞭毛是否為原來(lái)的大小和形狀？
３、鞭毛涂片與芽孢涂片有何區別？為什么？

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