食品中腸桿菌科檢驗方法

      腸桿菌科作為食品衛生指標菌在歐洲已有多年歷史，對其檢驗方法不少學(xué)者曾進(jìn)行了研究。目前北歐食品分析委員會(huì )（NMKL）及ISO已制定了食品中腸桿菌科檢驗的標準方法。包括了直接增菌和前增菌的定性方法；菌落計數和帶恢復的MPN定量方法。近年來(lái)，隨著(zhù)對外貿易的發(fā)展，歐洲一些國家已對我國出口的某些食品和動(dòng)物飼料提出了檢測和限量要求。且將其作為國際間食品微生物學(xué)實(shí)驗室質(zhì)量控制、水平測試的必測項目之一。我國大多數食品衛生檢驗人員對該項指標和檢驗方法缺乏了解，為適應外貿發(fā)展需要，原天津、遼寧商檢局的技術(shù)人員，采用標準菌株和自然食品樣品參照國外現有標準方法進(jìn)行了研究，制定了《出口食品中腸桿菌科檢驗方法》行業(yè)標準。該行業(yè)標準有如下特點(diǎn)：

　　1、制定了兩種定量檢驗方法，可根據對各種食品規定的不同限量標準或加工方式進(jìn)行選擇。菌落計數法適用于檢查未經(jīng)加工處理的生鮮食品或腸桿菌科計數限量>100/g的加工食品，帶恢復的MPN法適用于腸桿菌科計數≤100/g的加工食品。

　　2、采用了亞致死性損傷菌恢復步驟并成功地應用于MPN定量法中，對冷凍產(chǎn)品，加熱冷凍產(chǎn)品采用36±1℃4h恢復，對加熱干燥等處理過(guò)的食品需用36±1℃18－24h恢復。

　　3、將國外現有標準方法中EE肉湯作了改良，即將原配方中的膽汁含量由20g/L降至10g/L。大大降低了對腸桿菌科細菌的抑制力，提高了方法的靈敏度和檢出率。

　　4、對在分離培養基VRBGA上經(jīng)36±1℃培養24h后，菌落直徑仍<0.5mm的腸桿菌科。如奇異變形桿菌、小腸結腸炎耶爾森氏菌等延長(cháng)培養時(shí)間至48h，彌補了國外現有方法中僅在VRBGA 36±1℃培養24h后，挑選菌落直徑>0.5mm的腸桿菌科菌落可造成漏檢之不足。

　　5、NMKL法僅以氧化酶陰性、ISO方法以氧化酶陰性和葡萄糖瓊脂呈黃色為陽(yáng)性對腸桿菌科進(jìn)行確認。前法可將不發(fā)酵葡萄糖，但可利用蛋白胨生長(cháng)、氧化酶也為陰性的沃夫氏不動(dòng)桿菌誤判為腸桿菌科，造成假陽(yáng)性結果，使計數結果偏高；后法則易將葡萄糖瓊脂表面變?yōu)樗{色的陰溝腸桿菌，產(chǎn)氣腸桿菌和沙雷氏菌漏檢，出現假陰性，使計數結果偏低。本行業(yè)標準采用了氧化酶陰性，葡萄糖瓊脂發(fā)酵為全黃或黃色底層、藍色斜面，產(chǎn)氣或不產(chǎn)氣作為判定標準才可對腸桿菌科進(jìn)行準確的確認。

     6、方法的靈敏度 

（1）菌落計數法的靈敏度為≥10/g  

（2）帶恢復的MPN法的靈敏度為≤10/g或<100/g

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