一、實(shí)驗目的:
學(xué)習酵母菌種的擴大培養方法,為實(shí)驗室啤酒發(fā)酵準備菌種。
二、實(shí)驗原理:
在進(jìn)行啤酒發(fā)酵之前,必須準備好足夠量的發(fā)酵菌種。在啤酒發(fā)酵中,接種量一般應為麥芽汁量的10%(使發(fā)酵液中的酵母量達1×107個(gè)酵母/mL),因此,要進(jìn)行大規模的發(fā)酵,首先必須進(jìn)行酵母菌種的擴大培養。擴大培養的目的一方面是獲得足量的酵母,另一方面是使酵母由最適生長(cháng)溫度(28℃)逐步適應為發(fā)酵溫度(10℃)。
三、實(shí)驗器材:
恒溫培養箱,生化培養箱,顯微鏡等。
四、實(shí)驗步驟:
本次實(shí)驗擬用60升麥芽汁,因此應制備6000 mL含1×108個(gè)酵母/mL的菌種,以每班10個(gè)組計算,每個(gè)組應制備約600 mL菌種。建議流程如下:
取協(xié)定法制備的麥芽汁濾液(約400 mL),加水定容至約600 mL,取50 mL裝入250 mL三角瓶中,另550 mL至1000 mL三角瓶中,包上瓶口布后,0.05 Mpa滅菌30分鐘。
2. 菌種擴大培養
按上面流程進(jìn)行菌種的擴大培養(斜面活化菌種由教師提供)。注意無(wú)菌操作。
五、注意事項:滅菌后的培養基會(huì )有不少沉淀,這不影響酵母菌的繁殖。若要減少沉淀,可在滅菌前將培養基充分煮沸并過(guò)濾。
六、思考題:菌種擴大過(guò)程中為什么要慢慢擴大,培養溫度為什么要逐級下降?
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