啤酒酵母純種分離

錄入時(shí)間:2011-11-18 14:52:24 來(lái)源：生物在線(xiàn)

一、實(shí)驗目的：

學(xué)習酵母菌種的純種分離技術(shù)

二、實(shí)驗原理：

關(guān)于純種分離，在基礎微生物學(xué)實(shí)驗中已學(xué)過(guò)稀釋分離法和劃線(xiàn)分離法，這里不再重復。這兩種方法雖然簡(jiǎn)單，但并不能保證分離所得種的純度。而單細胞分離法因可用顯微鏡直接檢查，其純度能得到充分保證。

林德奈單細胞分離法，即小滴培養法，是將酵母菌液充分稀釋至每一小滴差不多含一個(gè)酵母細胞，然后在顯微鏡下確證只含一個(gè)細胞的小滴，經(jīng)適當培養后，擴大保存。

三、實(shí)驗器材與試劑：

顯微鏡，凹載玻片，計數板，蓋玻片等。

四、實(shí)驗步驟：

1. 取2塊蓋玻片，用分析天平稱(chēng)重（精確至0.1mg）后，在一塊蓋玻片（最好用血球計數板的蓋玻片）上用毛細滴管滴上9滴酵母培養基，合上另一玻片，再稱(chēng)重，計算每滴培養基的體積。

2. 用計數板計數酵母菌，用培養基對其進(jìn)行高倍稀釋?zhuān)♂屩撩康闻囵B基中大致含一個(gè)酵母菌。

3. 在已滅菌的蓋玻片上滴上酵母稀釋液（每張玻片可滴9滴），放于已滅菌的凹載玻片上，顯微鏡下觀(guān)察，找到只含一個(gè)酵母菌的小滴，做上記號。

4. 30℃培養一定時(shí)間后（應放于濕室中），用無(wú)菌濾紙片吸走標記的酵母菌，進(jìn)行擴大培養和菌種保藏。

五、注意事項：因小滴易干，操作時(shí)動(dòng)作要快，培養時(shí)要用濕室。

六、思考題：稱(chēng)重時(shí)為什么要用兩塊蓋玻片？是否可以用微量移液器（如1微升）來(lái)代替稱(chēng)重？