微生物細胞大小和數量的測定

一、測定微生物的大小

1. 測定的工具：目鏡測微尺    鏡臺測微尺

2. 目鏡測微尺的校正：在高倍鏡下，看清鏡臺測微尺的刻度后，轉動(dòng)目鏡，使目鏡測微尺與鏡臺測微尺的刻度平行，移動(dòng)推動(dòng)器，使目鏡測微尺的0點(diǎn)與鏡臺測微尺的某一刻度重合，然后，仔細尋找兩尺第二個(gè)完全重合的刻度。計算兩刻度間目鏡測微尺的格數和鏡臺測微尺的格數。由于鏡臺測微尺的刻度每格長(cháng)10µm，所以可得：                     

目鏡測微尺每格長(cháng)度（ µm）=（鏡臺測微尺格數×10）/目鏡測微尺格數

注意：校正目鏡測微尺必須針對特定的顯微鏡和附件（特定的接物鏡、接目鏡、鏡筒長(cháng)度等）進(jìn)行，而且只能在這特定的情況下才可重復使用。

3. 菌體大小的測定：取下鏡臺測微尺，將細菌染色標本置于載物臺上，然后在油鏡下用目鏡測微尺測量菌體的長(cháng)和寬。

二、測定微生物數量

方法：活菌計數法——平板菌落計數法；總菌計數法——血球計數板或霍瑟（Peroff  Hausser）細菌計數板（二者原理和部件相同，只是厚薄不同而已）。

本實(shí)驗用血球計數板計數酵母菌的數量                                                 

1. 取清潔無(wú)油的血球計數板，在計數室上面加蓋玻片。                                                          

2. 取酵母菌液，搖勻，用滴管由蓋玻片邊緣滴一小滴，使菌液自行滲入，計數室內不得有氣泡。

3. 靜止5min后，用低倍鏡觀(guān)察并將計數室移至視野中央。              

4. 在高倍鏡下計數：隨機計數五個(gè)中格的平均值，然后求得每個(gè)中格的平均值。乘上16（或25）就得出一大格中的總菌數，最后再換算到每mL菌液中的含菌數。

5. 計算方法：

酵母菌細胞數/mL=[（X1+X2+X3+X4+X5）/5]X 25（或16）X 10 X 1000 x 稀釋倍數

6. 注意事項：壓在方格線(xiàn)上的菌體，以壓在底線(xiàn)和右側線(xiàn)上的菌體計入本格內；遇到有芽體的酵母時(shí)，若芽體和母體同等大，就按單個(gè)酵母計數。

7. 計數完畢后，血球計數板要立即清洗干凈，并用吸水紙吸干，最后用擦鏡紙擦干凈，并放回盒內。

上一篇：革蘭陽(yáng)性球菌的鑒定

下一篇：用固體培養基對微生物進(jìn)行分離純培養