革蘭陽(yáng)性球菌的鑒定

革蘭陽(yáng)性球的菌鑒定Identification of Gram-positivc cocci

( 一) 革蘭陽(yáng)性球菌的基本特征

在血瓊脂平板上生長(cháng)，但在麥康凱、伊紅亞甲藍、中國藍瓊脂平板上不生長(cháng)，提示為革蘭陽(yáng)性球菌。但有些非發(fā)酵菌(如：艾肯菌屬、金氏桿菌屬、心桿菌屬等)在麥康凱平板上也不生長(cháng)。

( 二) 革蘭陽(yáng)性球菌的基本鑒定試驗要求

觸酶試驗是鑒定革蘭陽(yáng)性球菌的重要試驗(任何革蘭陽(yáng)性球菌必須先做觸酶試驗) ，此試驗不宜碰到血瓊脂，因為紅細胞內含有過(guò)氧化物酶，操作過(guò)程中若沾染紅細胞可造成假陽(yáng)性。

凝固酶試驗是鑒定葡萄球菌的重要試驗，此試驗有玻片法和試管法。須注意以下幾點(diǎn)。

(1 ) 有些葡萄球菌(昂和葡萄球菌、施氏葡萄球菌)凝固酶試驗玻片法陽(yáng)性，試管法驗證陰性，因其產(chǎn)生聚集因子。有些金黃色葡萄球菌玻片法陰性，試管法陽(yáng)性，因該金黃色葡萄球菌無(wú)結合凝固酶，有游離凝固酶。

(2) 試驗可使用EDTA 抗凝的兔血漿，不能使用枸櫞酸鹽抗凝，因為有些細菌可分解枸櫞酸鹽，可出現假陽(yáng)性。

(3)高鹽甘露醇瓊脂平板上的菌落不能用于凝固酶試驗，因高鹽可致菌體自凝。

( 三) 作為推測性鑒定的重要試驗

1.菌落特征

(1)溶血： 血平板上的溶血有助于一些細菌的初步鑒定，如金黃色葡萄球菌、鏈球菌屬等。

α 溶血: α溶血使菌落周?chē)�的血液部分溶解，其結果是菌落周?chē)�有一個(gè)草綠色的環(huán)，疑似肺炎鏈球菌和草綠色鏈球菌。

ß溶血: ß 溶血菌落周?chē)�的血液完全溶血，是由于紅細胞完全被溶解所致，如A 群ß溶血鏈球菌(化膿性鏈球菌)產(chǎn)生寬闊清晰的溶血環(huán)；B群ß溶血鏈球菌(無(wú)乳鏈球菌)和產(chǎn)單核細胞李斯特菌產(chǎn)生一個(gè)狹窄的分散溶血環(huán)。

(2) 衛星現象: 乏養菌屬、Granulicatella elegans

 2 . 鏡下形態(tài)

(1)革蘭陽(yáng)性球形、葡萄狀、單個(gè)、成雙的疑似葡萄球菌屬。

(2) 革蘭陽(yáng)性球狀、球桿狀、鏈狀(短鏈)排列、鏈的長(cháng)短不一(液體培養基中為長(cháng)鏈，固體培養基中為短鏈，短鏈由4~8 個(gè)細菌組成、長(cháng)鏈可達20~30 個(gè))的疑似鏈球菌屬。

(3) 革蘭陽(yáng)性矛頭狀、成雙或短鏈排列的疑似肺炎鏈球菌。

(4) 革蘭陽(yáng)性球桿狀、成雙、鏈狀的疑似乳球菌屬、明串珠球菌屬、格魯比卡菌屬等。

(5) 革蘭陽(yáng)性球狀、球桿狀的疑似乏養菌屬等。

(6) 革蘭陽(yáng)性球狀、成雙、鏈狀、成簇的疑似氣球菌屬、孿生球菌屬、創(chuàng )傷球菌屬、片球菌屬等。

(7)革蘭陽(yáng)性球桿狀、成雙、四聯(lián)狀的疑似差異球菌屬等。

(8) 革蘭陽(yáng)性球狀、成雙、成簇的疑似口腔球菌屬等。

(9) 革蘭陽(yáng)性球狀、成簇、四聯(lián)狀的疑似微球菌屬等。

注: 溶血孿生球菌扁平的側面相鄰，常是雙球狀。

3 . 觸酶試驗

(1)觸酶試驗陰性的革蘭陽(yáng)性球菌: 金黃色葡萄球菌厭氧亞種、解糖葡萄球菌、鏈球菌屬、腸球菌屬、乏養菌屬、氣球菌屬、狡詐球菌屬、費克藍姆菌屬 、孿生球菌屬、格魯比卡菌屬、創(chuàng )傷球菌屬 、Lgnavigranum 、乳球菌屬、明串珠球菌屬(Leuconostoc) 、足球菌屬(Pediococcus) 、Granulicatella 、Tetragenococcus 、Vagococcus 。

(2) 觸酶試驗陽(yáng)性的革蘭陽(yáng)性球菌：葡萄球菌屬、微球菌屬、口腔球菌屬、動(dòng)球菌屬、克氏考可菌屬、差異球菌屬、Rothia mucilaginosa等。

4 . 凝固酶試驗凝固酶試驗陽(yáng)性的葡萄球菌：金黃色葡萄球菌金黃色亞種、金黃色葡萄球菌厭氧亞種、施氏葡萄球菌聚集亞種、中間葡萄球菌、S. Lutrae 、豬葡萄球菌（l l % ~89 % 陽(yáng)'性) 。值得注意的是，如果菌落特征、鏡下形態(tài)符合葡萄球菌、觸酶陰性，應先用準確的方法作凝固酶試驗，陽(yáng)性為金黃色葡萄球菌慶氧亞種，陰性再進(jìn)一步鑒定。

5 . 高鹽甘露醇試驗  高鹽甘露醇試驗陽(yáng)性的葡萄球菌： 金黃色葡萄球菌。但有報道，少見(jiàn)的葡萄球菌也能分解高鹽甘露醇，故應用凝固酶試驗驗證。

6. CAMP 試驗  CAMP 試驗陽(yáng)性的革蘭陽(yáng)性球菌： B 群(無(wú)乳)鏈球菌。

7. 桿菌肽敏感試驗  桿菌肽敏感的革蘭陽(yáng)性球菌： A 群鏈球菌(化膿性鏈球菌) 。

8. Optochin 試驗 Optochin 試驗陽(yáng)性的革蘭陽(yáng)性球菌：肺炎鏈球菌。

9. 吡咯烷酮芳基酰接酶(PYR)  試驗陽(yáng)性的革蘭陽(yáng)性球菌： 腸球菌、化膿鏈球菌、草綠色氣球菌和某些凝固酶陰性葡萄球菌等。直接取細菌培養物，涂在含有PYR 的紙片上，置35℃孵育5 min ，滴加顯色劑若陽(yáng)性則可顯紅色，無(wú)顏色改變?yōu)殛幮浴?/SPAN>

1 0 . 觸酶試驗   觸酶陰性革蘭陽(yáng)性球菌的鑒定

11. 雙歧法試驗  常見(jiàn)凝固酶陰性葡萄球菌的鑒定

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