ELISA質(zhì)量控制--質(zhì)量控制血清

ELISA 是一種敏感性高、特異性強、重復性好的實(shí)驗診斷方法，由于其試劑穩定、易保存、操作簡(jiǎn)便、結果判斷較客觀(guān)等因素，以及既適宜于大規模篩查試驗又可以用于少量標本的檢測，既可以做定性試驗也可以做定量分析等優(yōu)點(diǎn)，已廣泛應用于微生物學(xué)、寄生蟲(chóng)學(xué)、腫瘤學(xué)和細胞因子等領(lǐng)域。ELISA 的影響因素較多，加強質(zhì)量管理才能充分發(fā)揮其方法學(xué)的優(yōu)點(diǎn)。
質(zhì)控血清是已有靶值的血清，在每次的常規檢驗中加入一份或數份，通過(guò)所得結果來(lái)了解本次檢驗的情況。質(zhì)控血清檢驗的結果如能控制其誤差在一定范圍內，就說(shuō)明該檢驗沒(méi)有發(fā)生不允許的誤差。如果出現超過(guò)允許誤差范圍的異常結果，提示該檢驗不合格，應尋找原因，糾正后，重檢待測標本。因此質(zhì)控血清在質(zhì)控工作中起重要作用。

一、質(zhì)控血清的使用

衛生部臨床檢驗中心制備的乙肝標志物質(zhì)控血清，可以在-20℃保持半年定值不變。冰凍狀態(tài)融化使用時(shí)，應先混勻，未用完部分可在4℃保存5天。不宜反復冰融或自行分裝。開(kāi)展某項檢驗的室內質(zhì)控工作需要的質(zhì)控血清，一般按3-6個(gè)月用量準備。自制的不定值質(zhì)控血清，在一批質(zhì)控血清將用完之前，需準備下一批質(zhì)控血清。質(zhì)控血清要求性能穩定，較長(cháng)期內效價(jià)不變，其理化性質(zhì)應與病人樣本相近，這樣才能有效地起到監測作用。

二、臨界值質(zhì)控血清

質(zhì)控制血清分定值和未定值兩種。如只用一份質(zhì)控血清定值，一般定在正常值與異常值交界點(diǎn)上，定性測定時(shí)處于弱陽(yáng)性水平，稱(chēng)為臨界值。乙肝標志物臨界值的制定，應按臨床要求，為臨床提供統一的判斷弱陽(yáng)性的標準。 臨界值質(zhì)控血清可以作為試劑盒中的陽(yáng)性對照品和陰性對照品以外的第三個(gè)對照品，它可以靈敏地反映出試劑盒的檢出水平，確保弱陽(yáng)性反應的標本不漏檢。

三、質(zhì)控血清的制備

每個(gè)實(shí)驗室可以根據自己的條件，選用臨床中心提供的質(zhì)控血清，或按以下方法自己制備本室使用的質(zhì)控血清(以乙肝質(zhì)控血清為例)。

(1)收集新鮮的無(wú)溶血、無(wú)黃疸、無(wú)細菌污染的陽(yáng)性血清。
(2)56℃加熱10小時(shí)去活。
(3)離心或過(guò)濾除去沉淀。
(4)用10%的小牛血清或正常人血清(PBS緩沖液)將收集的血清稀釋至所需的濃度。如 能用正常的人血清稀釋更好，因其成份更接近于檢測標本。
(5)抽濾除菌。按一次使用的量分裝小安瓿，封口，20℃保存備用。不可反復凍融。被檢物要求檢出的水平常被認為是質(zhì)控血清應選擇的水平。如果該試驗還有其它要求，則應加所要求濃度的質(zhì)控物。
(6)標定含量。20-30次測定結果刪除>±2SD數據的均值作為靶值，并與已知定值血清對比測定。
 

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