真菌學(xué)檢驗標本采集

標本采集Collection of specimens

 (一) 皮屑

(1)需檢查的皮損部位在檢查前1 周不應使用任何抗真菌藥物。

(2) 局部75 % 乙醇(酒精)消毒，輕輕刮取皮屑至載玻片上，滴1 滴5 %~ 10 %氫氧化鉀(KOH ) ，蓋上蓋玻片后置鏡下檢查。

(3) 取皮屑接種于沙氏瓊脂斜面2 管，其中一管加氯霉素和放線(xiàn)菌酮，置25℃ ; 另一管不加抗生素，置37℃ ，培養2-4 周。

(4) 皮屑中最常見(jiàn)的真菌為皮膚癖菌、念珠菌和花斑癬菌，真菌檢查陽(yáng)性即可確定有真菌感染。

（二）甲屑

(1)病甲乙醇消毒后，刮取病甲屑，滴10 %- 20 % KOH 后鏡檢。

(2) 培養同皮屑。

( 三) 毛發(fā)

(1)病發(fā)表現為枯黃無(wú)光澤或脆易折斷。取病發(fā)3 - 5 根，滴10 %- 20 % KOH ，輕壓后置鏡下檢查。

(2) 鏡檢見(jiàn)有發(fā)內菌絲，發(fā)外孢子或發(fā)內孢子為陽(yáng)性，表示有皮膚癬菌感染。

(3) 培養需取病發(fā)5-10 根，方法與皮屑培養同。

（四）膿液

(1) 膿液標本應置無(wú)菌廣口有蓋玻璃瓶或小的無(wú)菌平皿中，立即送檢。若服液過(guò)少，可將膿液置無(wú)菌試管中，加2 ml 無(wú)菌蒸餾水稀釋以防干燥。

(2) 應注意膿液中有無(wú)顆粒。

(3) 培養接種沙氏瓊脂2 管，一管加氯霉素，置25℃; 另一管不加抗生素，置37℃ ，培養4 周。

(五) 腦脊液

(1)常規腰椎穿刺，取腦脊液3-5 ml ，立即送檢，時(shí)間不宜超過(guò)1 h 。

(2) 腦脊液2 500 r/ min 離心1 5 min。

(3) 無(wú)菌吸取離心沉淀物1 ml ，接種沙氏瓊脂2 管，同膿液標本。

(4) 取離心沉淀物1 滴作墨汁涂片，發(fā)現隱球菌即可確定診斷。應立即通知有關(guān)的主管醫師，不必等待培養結果，以免延誤治療。

（六）血液

常規使用的細菌肉湯培養基或自動(dòng)化血培養儀的標準或去抗生素細菌培養瓶，可用于血液真菌培養，或使用腦心浸膏肉湯，置37℃培養4-6 周。培養基混濁或出現菌團表示可能有菌落生長(cháng)，可挑取鏡檢并同時(shí)移種于沙氏瓊脂或其他特殊培養基。

（七） 其他體液

(1)其他體液包括支氣管黏液、關(guān)節腔積液、心包積液、腹水、胸腔積液、胸膜積液等。

(2) 取10 ml，離心，留約2 ml 沉淀液。

(3) 直接鏡檢并真菌培養2 管，同膿液標本。

(八) 痰

(1)取晨痰。刷牙后漱口。用力咳出肺部深處痰液，置無(wú)菌廣口有蓋的玻璃瓶中，蓋緊，立刻送檢。

(2) 標本檢查應避開(kāi)唾液， 取黃色、棕色或帶血部分。直接鏡檢用5 % -10 % KOH 。疑新型隱球菌，用墨汁涂片。

(3) 培養2 管，同膿液標本。

（九）尿

(1)取晨尿。先清洗外陰，留置中段尿。女性以導尿最為理想。置廣口無(wú)菌玻璃瓶，蓋緊立即送檢。

(2) 尿液離心后檢查。

(3) 直接鏡檢，培養同膿液標本。

( 十) 糞便

(1)應挑取有膿血或粘液的糞便，置無(wú)菌有蓋紙盒中立刻送檢。

(2) 挑取困難者可取直腸拭子2 支，加1 ml 無(wú)菌蒸餾水，置有塞試管中，立刻送檢。

(3) 鏡檢和培養同膿液標本。

（十一） 骨髓

(1)骨髓標本不作常規采用。僅用于高度疑似播散性組織胞漿菌病、播散性馬尼菲青霉病或其他播散性真菌感染。

(2) 骨髓取材常規使用含抗凝劑注射液抽取骨髓0.5~ lml ，接種沙氏瓊脂2 管。一管加氯霉素，置25℃；另一管不加抗生素，置37℃培養4 ~ 6 周。

(3) 直接鏡檢應染色，用嗜銀染色(GMS) 或Wright 染色(組織胞漿菌病) 。

（十二） 拭子

(1) 用于采集口腔、咽喉、外耳道、陰道和直腸黏膜標本。

(2) 使用2 ~3 根，不能單根。

(3) 拭子至取材部位旋轉數次并稍加壓，完畢后放入內裝1 ~2 ml 無(wú)菌蒸餾水試管，塞好棉塞或蓋好，立即送檢。

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