抗菌藥物的敏感試驗——稀釋法

稀釋法

即最低(或最小)抑菌濃度( minimal inhibitory concentration, MIC)的測定。

1.基本原理在肉湯或瓊脂中將抗菌藥物進(jìn)行一系列(對倍)稀釋后，定量接種待檢菌，35℃孵育24 h后觀(guān)察。待檢菌肉眼未見(jiàn)生長(cháng)的最低藥物濃度，即為該藥物對待檢菌的最低抑菌濃度。

2 . 試驗方法 取無(wú)菌試管26 支，排成兩排。另取3 支試管，分別作為肉湯對照管、待檢菌生長(cháng)對照管和質(zhì)控菌生長(cháng)對照管。每管加入M- H 肉湯2 ml，在第1 管加入經(jīng)M- H 肉湯稀釋的藥物原液( 256 mg/ L)2 ml 混勻，然后吸取2 ml 至第2 管，混勻后再吸取2 ml 至第3 管。如此連續對倍稀釋至第13 管，并從第13管中吸取2 ml 棄去。此時(shí)各管含藥濃度依次為128、64、32、16、8、4、2、1、0.5、0.25、0.125、0.0625、0.03125 mg/ L 。第1 排試管每管加入待檢菌菌液(1 X 107 CFU/ ml0.1 ml ，第2 排試管每管加入標準菌菌液(1 X 107 CFU/ ml) 0.1 ml，最終接種菌量約為5 X 105 CFU/ ml 。置35℃培養箱孵育18~24 h，觀(guān)察有無(wú)細菌生長(cháng)。

3. 結果判斷藥物最低濃度管無(wú)細菌生長(cháng)者(對照管細菌生長(cháng)良好) ，即為待檢菌的最低抑菌濃度( MIC)不計。

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