玻片沉淀反應
此方法具有快速、不需要設備和提取免疫球蛋白的優(yōu)點(diǎn),但靈敏度不高。
1.實(shí)驗材料和用具
(1)正常血清和抗血清
(2)系統感染病毒的植株和健康植株
(3)生理鹽水和0.01MPBS緩沖液
(4)載玻片、玻棒、研缽、微量離心管、飯盒、臺式離心機、25oC溫箱
2.實(shí)驗步驟
(1)用生理鹽水稀釋血清為三個(gè)濃度:1,1 ∶5,1 ∶10。
(2)取1cm 顯癥葉片,加2mlPBS緩沖液研磨,取汁液,3000轉離心2分鐘后得懸浮液約為1 ∶10,再配成1 ∶20抗原懸浮液。設置健康對照。
(3)取潔凈載片,兩端分別滴加正常血清和抗血清30 μl。
(4)再滴加等量抗原懸浮液。
(5)用玻棒攪勻后將玻片放入飯盒保溫,在25oC溫箱中孵育25-40分鐘。
(6)解剖鏡或低倍顯微鏡中觀(guān)察沉淀形成并記錄結果。