L型細菌及其感染（上）

　　L型細菌（L菌）早就發(fā)現了，只是直到近20多年來(lái)由于檢驗技術(shù)不斷地改善，才對L菌及其感染有了較為深入的認識，有關(guān)的報道才越來(lái)越多，其所致的病種范圍也在不斷地擴大。據國內擬診敗血癥的萬(wàn)余例一般培養的結果，有細菌生長(cháng)者僅占17.8%～18.4%，即使診斷為菌血癥者，細菌培養陽(yáng)性者也僅占42％，膿汁培養陰性者達到27.3％，普通培養陰性者除疑厭氧菌外，就疑L菌；另有材料云，敗血癥常規血培養陽(yáng)性率為13.2％，L菌的檢出率為36.3％，甚有高至60％～80％；急性風(fēng)濕熱患者有83％從血中培養到L型鏈球菌；尿道感染尿常規培養細菌檢出率為9.9%,L菌占33.9％，后者中大腸桿菌L菌占23.1％，金葡菌L菌占21.4％。于今對L菌的認識已不僅是細菌形態(tài)學(xué)問(wèn)題，而是涉及到傳染病學(xué)、遺傳學(xué)、病理學(xué)、細胞生物學(xué)、免疫學(xué)及生物制品質(zhì)控等廣泛領(lǐng)域的重要問(wèn)題［１］。因而作者據手頭資料就此題目作一扼要介紹于下。     
                   
　　1  L菌名稱(chēng)的由來(lái)

    1935年英國學(xué)者Klieneberger在研究鼠咬熱的病原體念珠狀鏈桿菌時(shí)，意外地發(fā)現了一種肉眼可見(jiàn)的微小菌落，其菌體呈高度多型性，認為是該菌的一個(gè)變種；因為該變種是在Lister醫學(xué)研究所內發(fā)現的，即取其第一個(gè)字母以命名，故稱(chēng)為L(cháng)菌。Lister是英國著(zhù)名的微生物學(xué)家。L菌也稱(chēng)細菌L型，其可見(jiàn)的英文名稱(chēng)就有5個(gè)之多，即L-form、L-phase、L-organism、L-phase variant和Cell wall deficient bacteria，以前者為常見(jiàn)。

　　2  L菌的分布

    此型細菌分布極廣，可以說(shuō)凡有細菌存在之處，如土壤、河水、動(dòng)物器官及人體組織等，便有L菌的存在；病原微生物的L菌保存著(zhù)一定的毒力，具有致病性。已經(jīng)發(fā)現一些真菌和螺旋體也會(huì )變成L菌。

　　3  L菌的形成

    凡能直接或間接地作用于菌壁，使其產(chǎn)生亞致死性損害的各種因素，均可誘生出L菌。其機制有以下兩種：

　　3.1  自發(fā)形成 

　　很少見(jiàn)，機制不明；目前所知只有念珠狀鏈桿菌和擬桿菌可自然形成。

　　3.2  誘導產(chǎn)生 

　　抗生素如青霉素類(lèi)、頭孢菌素類(lèi)、萬(wàn)古霉素、桿菌肽和溶葡萄球菌素等，在長(cháng)期給藥后；酶的作用如溶菌酶和脂酶等；免疫作用如抗體、補體噬菌體和吞噬細胞等；氨基酸如甘氨酸、蛋氨酸和甲硫氨酸等；理化因素如亞硝酸鹽、D-環(huán)絲氨酸、紫外線(xiàn)、去氧膽酸鹽等，均可誘生此型細菌。這些因素導致產(chǎn)生L菌的機制有4種：改變細菌的DNA；破壞細菌的細胞壁；阻斷細菌的肽聚糖的合成和機體的免疫干擾［２］。

    G＋球菌以金葡菌為代表說(shuō)明之。金葡菌的細胞壁的主要成分為黏肽，占胞壁干重的50％～80％。β-內酰胺類(lèi)抗生素和溶菌酶均可干擾其合成，使菌壁出現缺陷；溶菌酶還能破壞乙酰葡糖胺和乙酰胞壁酸分子間的連接；半合成青霉素的脂溶性強；這些均會(huì )破壞菌壁。G-桿菌的細胞壁的主要成分是脂多糖，黏肽含量少，只占菌壁干重的1％～10％，故不受β-內酰胺抗生素的影響，但可被脂酶所損害，進(jìn)而菌壁便遭破壞。

　　4  L菌的形態(tài)與生物學(xué)特性

　　4.1  形態(tài)學(xué)特性 

　　(1)細胞壁缺損：此型細菌雖然胞壁缺如或殘缺不全，但是只要其胞漿完整無(wú)損，在高滲環(huán)境中依然具有生命力，可生長(cháng)繁殖；(2)基本形態(tài)：高度多形性，可表現為球狀、桿狀、鏈狀及絲狀形，且大小不一；菌落微小，直徑只1μm左右；在瓊脂培養基上，進(jìn)而細胞壁便遭破壞菌落內陷，與普通的菌落外凸不同；在低倍顯微鏡下，菌落呈“油煎蛋”樣；在高倍鏡下，菌落邊緣為大形菌，比親本菌株要大，中心為小形菌。

　　4.2  生物學(xué)特性 

　　(1)嗜高滲性：只有在高滲環(huán)境中才能生長(cháng)，在普通的培養基上不生長(cháng)；由于已經(jīng)失去了堅固的菌壁，只剩下一層胞漿膜，故在非高滲的環(huán)境中，菌體就會(huì )迅速地溶解而死亡；如L型金葡菌在蒸餾水中3min就會(huì )裂解，2h后消失，在0.1%～0.2％的氯化鈉溶液中，15min后，細菌減少90％，而在2%～15％的氯化鈉溶液中，菌體則無(wú)變化； (2)返祖性：這是一個(gè)重要的生物學(xué)特性；當抑制、破壞菌壁的因素去除后，L菌又恢復了完整的細胞壁，變回親本菌株，又有了親本菌株的特性，這就是返祖性。返祖性又可分為下列兩種，即①易變性L(fǎng)菌：當抑制、破壞細胞壁的因素去除后很快回復到親本菌株的L菌稱(chēng)之；臨床分離到的多為此型；通常剛形成的或細胞壁缺陷較輕的L菌較易返祖，細胞壁完全缺如者則不易返祖；②穩定性L(fǎng)菌：當抑制、破壞細胞壁的因素去除后，經(jīng)過(guò)多次傳代仍然保持著(zhù)L菌的特性稱(chēng)之；嚴格地說(shuō)，只有這一型的細菌才能稱(chēng)為L(cháng)菌；(3)弱抗原性：細菌的主要抗原在胞壁及其表面的附屬物上，一旦菌壁缺失，就會(huì )導致抗原性大為減弱，乃至消失；L菌可長(cháng)存于宿主的體內，并抗拒宿主的防衛機制；它雖具抗原性，但抗原性薄弱，因此能逃避宿主免疫系統的自衛性攻擊；這就是L菌得以長(cháng)存于宿主體內的原因。

　　5  L菌的培養

    它可分為3種類(lèi)型，即液體增菌培養基、液體培養基和固體培養基。在普通培養基中可加入滲透壓穩定劑20％的人血漿（或馬血漿）和5％氯化鈉，也有用10％馬血漿和3%～5％氯化鈉(或12%～15％蔗糖)；固體培養基現多用成品Kagan培養基；國內多用改良培養基。要用特殊的高滲培養劑是因為L(cháng)菌的胞膜內蛋白質(zhì)含量高，導致滲透壓高于胞膜外，培養時(shí)需要有一定的高滲環(huán)境才能穩住菌形不變。這也就是L菌常規培養陽(yáng)性率不高的原因�，F在知道L菌也存在于紅細胞內，當紅細胞裂解時(shí)此菌就大量釋入于血中，故有學(xué)者就把采得的血標本用溶血法把紅細胞溶解來(lái)培養L菌，結果常規培養檢出率為1.4％（3/210份），溶血培養檢出率為48.5％（102/210份），檢出率明顯提高［３］。

　　6  L菌與支原體的實(shí)驗室區別

    兩者極易混淆，必須認真鑒別，其鑒別點(diǎn)如下： L菌的形成是外界因素影響所致，而支原體則是固有形態(tài)，在分類(lèi)學(xué)上毫無(wú)關(guān)系；L菌的菌落較大，為0.5～1.0mm,支原體的菌落則較小，為0.1～0.3mm；L菌有返祖性，支原體則無(wú)此特性；保色時(shí)間有別，L菌因為菌壁缺陷，致結晶紫易滲入，和支原體一樣均可被染成藍色，但前者的保色時(shí)間較長(cháng)，后者則相反，很快褪色；兩者無(wú)共同的抗原性，不發(fā)生交叉反應；L菌在增殖期不需要膽固醇，而支原體則需要此種物質(zhì)。

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