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2.3 人工污染樣品檢測結果
純菌污染樣品檢測結果：用單增李斯特菌
單增李斯特菌和非李斯特菌混合污染樣品檢測結果：將單增李斯特菌和非李斯特菌10-3～10-8 混合菌液污染牛奶和豬肉后，國標檢測結果表明，這4種培養基上都可以檢測出單增李斯特菌，說(shuō)明非李斯特菌存在時(shí)，HKListeria、CHROMagarListeia、OXA、MMA仍可以達到相同的效果，非李斯特菌對單增李斯特菌沒(méi)有太大影響。單增李斯特菌、英諾克和非李斯特菌混合污染樣品檢測結果：當單增李斯特菌和英諾克按100 cfu：10 cfu混合污染牛奶和豬肉后，按國標法4種培養基都可檢出單增李斯特菌，在HKListeria和CHROMagar Listeia上呈現藍色帶暈環(huán)菌落，英諾克呈現藍色無(wú)暈環(huán)菌落，其他雜菌基本不長(cháng)，在OXA和MMA上單增李斯特菌和英諾克都分別呈現黑色和藍白色菌落，二者無(wú)法區分；當單增李斯特菌和英諾克按10 cfu：10 cfu和10 cfu：100 cfu比例混合時(shí)，HKListeria和CHROMagar Listeia上只有英諾克生長(cháng)，單增李斯特菌和其他非李斯特菌均未生長(cháng)，表明英諾克存在時(shí)對單增李斯特菌檢測有一定影響。
2.4 實(shí)際樣品檢測
實(shí)際樣品檢驗結果如表4。62份實(shí)際樣品共檢出李斯特菌15份，其中豬肉檢出英諾克4株，格式李斯特2株；雞肉檢出單增李斯特菌1株，英諾克3株，格式李斯特2株；魚(yú)肉檢出英諾克2株；牛肉檢出英諾克1株；其他樣本未檢出。陽(yáng)性樣品在4種培養基上檢測結果符合率為100％ 。HKListeria、CHROMagar Listeia的檢測效果優(yōu)于OXA、MMA，能夠區分單增李斯特菌和其他李斯特菌。表4 實(shí)際樣品中李斯特菌檢測結果
|
樣品 |
HKListeria |
CHROMagarListeria |
OXA |
MMA |
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豬肉（19份） |
6（31.6%） |
6（31.6%） |
6（31.6%） |
6（31.6%） |
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牛肉（5份） |
1（20%） |
1（20%） |
1（20%） |
1（20%） |
|
雞肉（17份） |
6（35%） |
6（35%） |
6（35%） |
6（35%） |
|
魚(yú)肉（10份） |
2（20%） |
2（20%） |
2（20%） |
2（20%） |
|
熟食（3份） |
0 |
0 |
0 |
0 |
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蔬菜（4份） |
0 |
0 |
0 |
0 |
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蛋糕（4份） |
0 |
0 |
0 |
0 |
括號中表示同一類(lèi)樣品中陽(yáng)性樣本的檢出率
3 討論
利用顯色培養基鑒定細菌是一種新的快速檢測方法，通過(guò)在培養基中加入細菌特異性酶的顯色底物，直接觀(guān)察菌落顏色就可對菌種作出鑒定 。在HKListeria和CHROMagarListeria顯色培養基上，單增李斯特菌呈現藍色帶暈環(huán)的菌落，其他李斯特菌呈現藍色不帶暈環(huán)的菌落。金黃色葡萄球菌、蠟樣芽胞桿菌、糞鏈球菌等雜菌或被抑制或沒(méi)有暈環(huán)，菌落形態(tài)與單增李斯特菌有明顯區別。
在本試驗中，對單增李斯特純菌液、單增李斯特和非李斯特菌混合菌液的檢測結果表明，HKListeria、CHROMagar Listeria上單增李斯特菌的檢出率與對照平板TSA—YE沒(méi)有明顯差異，說(shuō)明HKListeria和CHROMagar Listeria對單增李斯特菌基本沒(méi)有抑制作用；人工污染樣品和實(shí)際樣品檢測結果表明，HKListeria和CHROMagar Listeia具有更高的檢測效率，可根據菌落顏色和形態(tài)直接對單增李斯特菌作出鑒定，而OXA、MMA上生長(cháng)的菌落還需進(jìn)一步生化鑒定才能確定結果。因此，HKListeria和CHROMagar Listeria具有較高靈敏度、特異性和選擇性，是非常有價(jià)值的分離平板，可為食品微生物的快速檢測提供有力幫助。
另外，試驗中還發(fā)現，當樣品中英諾克數量高于單增李斯特菌時(shí)，單增李斯特菌不能夠有效地檢出。Restaino L等人也曾有類(lèi)似的報道，英諾克數量高時(shí)容易造成單增李斯特菌檢測結果的假陰性。分析可能是英諾克在增菌過(guò)程中生長(cháng)過(guò)快，數量過(guò)多，對單增李斯特菌產(chǎn)生了一定的競爭或抑制作用。因此，在使用顯色培養基檢測單增李斯特菌時(shí)，要特別注意英諾克的干擾問(wèn)題。
作者：張淑紅 ，吳清平，張菊梅
作者單位：廣東環(huán)凱微生物科技有限公司，廣州 510070；2．廣東省微生物研究所 廣東省菌種保藏與應用重點(diǎn)實(shí)驗室，廣州 510070
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