直接染色鏡檢
用棉拭采取假膜邊緣部滲出物,涂片,用奈瑟氏染色或美蘭染色,鏡檢有無(wú)含異染顆粒的棒狀桿菌。結合臨床癥狀,可作出初步診斷。確診必須通過(guò)細菌培養并進(jìn)行毒力試驗。
凝固血清棉拭培養法
將沾有馬或牛血清的棉拭子放在無(wú)菌試管內,經(jīng)8~10磅蒸氣滅菌20~30分鐘,并使血清凝固,且此凝固血清棉拭采取病人咽部標本,置37℃培養8~10小時(shí)后,直接涂片鏡檢。此法可作為大量檢查時(shí)快速培養診斷之用。
培養檢查
將棉試檢材接種于雞蛋斜面或loeffer's血清凝固斜面培養基及亞碲酸鉀平板培養基上,置37℃培養,待斜面或平板上長(cháng)出典型的灰色疑菌落,挑取轉種到雞蛋呀或血清斜面進(jìn)行分離培養,以供進(jìn)一步形態(tài)染色或毒力試驗鑒定。
豚鼠試驗
取體重250g豚鼠2只,其中一只試驗前12小時(shí),由腹腔注射白喉抗毒素250~500單位,供做對照。然后對照。然后各于皮下注射48小時(shí)的培養液2ml,若于2~4天注射抗毒素的豚鼠死亡,而對照豚鼠存活,便證明所試驗菌株為有毒白喉桿菌。
E平板試驗
將浸有白喉抗毒素的無(wú)菌濾紙條貼在含20%馬血清的瓊脂平板上,然后沿濾紙條垂直方向劃線(xiàn)接種待測細菌,同時(shí)也接種已知產(chǎn)毒株和不產(chǎn)毒株做為對照。37℃培養48小時(shí)后,若待檢菌株產(chǎn)生白喉外毒素,則在濾紙條和劃線(xiàn)生長(cháng)的菌苔交界外出現白色沉淀線(xiàn)。
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