微生物發(fā)酵對溪黃草抑菌效果的影響（2）

3  結果 

　　3.1  微生物發(fā)酵對溪黃草抑制細菌生長(cháng)的影響從表1可知溪黃草對白葡萄球菌的抑制作用比對大腸桿菌的抑制作用明顯。表1  發(fā)酵溪黃草的抑菌效果（略）   

　　經(jīng)枯草桿菌發(fā)酵和未經(jīng)枯草桿菌發(fā)酵的溪黃草醇提物對細菌都具有一定的抑制作用，其中經(jīng)枯草桿菌發(fā)酵后溪黃草的抑菌效果反而降低。表2結果發(fā)現發(fā)酵過(guò)程中枯草桿菌的生長(cháng)會(huì )受到溪黃草的抑制，另外用溪黃草提取物直接進(jìn)行平板試驗，對枯草桿菌的抑菌直徑為5.50 mm，也證實(shí)溪黃草對枯草桿菌生長(cháng)的抑制。但不添加其他營(yíng)養（I）時(shí)枯草桿菌仍然生長(cháng)，證明枯草桿菌能利用溪黃草成分�？莶輻U菌發(fā)酵會(huì )降低溪黃草的抑菌效果，可能是由于枯草桿菌在發(fā)酵過(guò)程中分解利用了抑菌有效成分或使抑菌有效成分降解。表2  微生物發(fā)酵后的菌落數（略） 

　　從表1可以看出，酵母菌發(fā)酵后溪黃草的抑菌效果大大加強，但與乳酸菌不同，酵母菌本身不含抑菌物質(zhì)，因此發(fā)酵后其抑菌物質(zhì)仍來(lái)源于溪黃草。溪黃草對酵母菌生長(cháng)的抑制作用也比對大腸桿菌和白葡萄球菌的抑制作用強（d＝6.29 mm），因此不論有沒(méi)有添加培養基，酵母在含溪黃草中培養時(shí)基本不增長(cháng)，但發(fā)酵前后可以檢測出活酵母菌，說(shuō)明了在發(fā)酵過(guò)程中，酵母菌能生長(cháng)。根據上述結果，認為經(jīng)酵母菌發(fā)酵后溪黃草的抑菌效果增強的主要原因是由于酵母菌存在使溪黃草提取物中抑菌有效成分增加。 

　　3.2  微生物發(fā)酵對溪黃草抑制霉菌生長(cháng)的影響經(jīng)枯草桿菌、乳酸菌和酵母菌發(fā)酵的溪黃草醇提物作用于黑曲霉和青霉菌都沒(méi)有產(chǎn)生明顯的抑菌圈，這和其他文獻報道的溪黃草的醇提物對霉菌抑制效果不明顯［2］相一致。 

　　經(jīng)乳酸菌發(fā)酵（包括乳酸芽孢桿菌和美樂(lè )多乳酸菌）的溪黃草醇提物對照組Ⅲ和Ⅴ在平板培養后，霉菌的生長(cháng)不鋪過(guò)濾紙片，而其他在平板培養后有少量的霉菌在濾紙片上生長(cháng)，說(shuō)明乳酸菌醇提物對霉菌也有一定抑菌效果。 

　　利用酵母菌發(fā)酵的Ⅴ在培養后霉菌鋪過(guò)了濾紙片生長(cháng)，Ⅱ和Ⅳ培養后有少量的霉菌在濾紙片上生長(cháng)，而Ⅰ和Ⅲ培養后霉菌的生長(cháng)并不鋪過(guò)濾紙片，這可能同樣是酵母菌發(fā)酵過(guò)程使溪黃草提取物抑菌有效成分濃度更高，使其抑制作用更強。 

　　3.3  纖維素酶處理對溪黃草抑菌作用的影響實(shí)驗發(fā)現溪黃草醇提前先經(jīng)過(guò)纖維素酶處理，其抑制細菌作用較未經(jīng)酶處理的溪黃草醇提物有較大增強（表3）。當纖維素酶用量增加，溪黃草的醇提物的抑菌作用也隨之增強。表3  纖維素酶處理后溪黃草的抑菌效果（略）   

　　實(shí)驗發(fā)現經(jīng)纖維素酶處理的溪黃草的醇提物對于霉菌（包括黑曲酶和青霉菌）都無(wú)明顯抑制作用，但是經(jīng)纖維素酶處理后的溪黃草醇提物，霉菌不覆蓋濾紙片生長(cháng)，而溪黃草的原藥醇提物則有少量的霉菌在濾紙片上生長(cháng)。   

　　添加纖維素酶對溪黃草進(jìn)行預處理后，纖維素酶起到了破壁作用使得溪黃草的抑菌有效成分能夠更容易地溶于乙醇中，從而增強了抑菌效果,這與其他應用纖維素酶提取中藥時(shí)的效果一致［8，9］。根據結果，進(jìn)一步推斷上述酵母發(fā)酵溪黃草使其抑菌作用大大增強是由于酵母起到了破壁作用，使抑菌成分含量增加，同時(shí)酵母不會(huì )破壞抑菌成分。   

　　纖維素酶是可以由真菌和細菌等微生物在特定的條件下產(chǎn)生，那么利用微生物直接處理中藥就可以起到破壁的作用，在大生產(chǎn)中可以降低原料的成本和簡(jiǎn)化操作。 

　　4  結論   

　　實(shí)驗結果證實(shí)溪黃草對于細菌的抑制效果比較明顯，對霉菌有一定的抑制效果。實(shí)驗結果顯示枯草桿菌和乳酸菌不能提高溪黃草抑菌效果，反而會(huì )使其抑菌效果下降；酵母菌發(fā)酵溪黃草可使其抑菌作用得到明顯提高，與用纖維素酶處理效果相似，證明利用合適菌種發(fā)酵提高藥材有效成分的利用率是可行的。同時(shí)，通過(guò)試驗證實(shí)中藥材可以為某些菌的生長(cháng)提供必要的物質(zhì)，可用于開(kāi)發(fā)利用藥渣，充分利用藥材資源。

作者：劉志偉 盧彩煥 張晨

【參考文獻】

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