海博微信公眾號
海博天貓旗艦店
海博微信公眾號
海博天貓旗艦店
培養材料采集
要根據培養目的適當選取材料，選擇原則：易于誘導、帶菌少。要選取植物組織內部無(wú)菌的材料。這一方面要從健壯的植株上取材料，不要取有傷口的或有病蟲(chóng)的材料。另一方面要在晴天，最好是中午或下午取材料，決不要在雨天、陰天或露水未干時(shí)取材料。因為健壯的植株和晴天光合呼吸旺盛的組織，有自身消毒作用，這種組織一般是無(wú)菌的。
培養材料的消毒
從外界或室內選取的植物材料，都不同程度地帶有各種微生物。這些污染源一旦帶人培養基，便會(huì )造成培養基污染。因此，植物材料必須經(jīng)嚴格的表面滅菌處理，再經(jīng)無(wú)菌操作手續接到培養基上�！ �
試劑
· 乙醇。
· 吲哚乙酸（ IAA） 或 2 ，4 – D （生長(cháng)素類(lèi)似物）。
· 氯化汞（升汞）或次氯酸鈉。
· 6- 芐基氨基腺嘌呤（ 6-BA ）
· MS 培養基
·0.1 mol/L NaOH與 0.1 mol/L HCl
配制培養基
（ 1 ）愈傷組織誘導培養基： MS 培養基（蔗糖含量為 10 g/L ， 2,4 – D 含量為 2 mg/L ，瓊脂 10 g/L ）。
（ 2 ）試驗培養基：在 MS 培養基中加入 IAA 和 6–BA 。
吲哚乙酸（IAA)先用少量 0.1 mol/L NaOH 溶解， 6- 芐基氨基腺嘌呤先用少量 0.1 mol/L HCl 溶解，然后用蒸餾水稀釋?zhuān)偌尤肱囵B基中。
儀器設備 培養室，高壓滅菌鍋，水浴鍋，解剖刀，三角燒瓶（ 100mL ），燒杯，量筒，培養皿，棉線(xiàn)，接種箱或超凈工作臺，分析天平，長(cháng)鑷子，剪刀，容量瓶，移液管，牛皮紙。
培養基滅菌 將配好的培養基加入瓊脂加熱溶解，調至 pH 5.8 ，趁熱分裝于 100 mL 三角燒瓶中，每瓶約 20 mL 。待培養基冷卻凝固后，用一層稱(chēng)量紙和一層牛皮紙包扎瓶（管）口，并用棉線(xiàn)扎牢，然后在高壓滅菌鍋中 121 ℃（ 1 kg/cm 2 ）下滅菌 20 min 。取出三角燒瓶放在臺子上，冷卻后備用。接種操作所需的一切用具（如長(cháng)鑷子、解剖刀、剪刀等）及滅菌水，需同時(shí)滅菌。
上一篇：植物組織培養的特點(diǎn)
下一篇：標本常用染料性能簡(jiǎn)介
