酸奶中嗜熱鏈球菌的分離及鑒定（2）

2   結果與分析

2.1 乳酸菌分離與純化的結果

酸奶稀釋涂布平板培養48 h后，在 BCG牛乳培養基上有很多黃色菌落，菌落周?chē)�培養基變?yōu)辄S色，此即為嗜熱鏈球菌疑似菌落。菌落特征為：黃色、扁平、邊緣不整齊、菌落平均大小為1.37mm。取具有上述特征的菌落進(jìn)行進(jìn)一步劃線(xiàn)分離，最終獲得純化菌株，編號為M1。 

2.2 M1的革蘭氏染色結果及形態(tài)觀(guān)察

M1菌體革蘭氏染色為藍紫色，革蘭氏陽(yáng)性。菌體球形或卵圓形，排列成對或形成長(cháng)短不等的鏈狀。

2.3發(fā)酵產(chǎn)物紙層析實(shí)驗結果

將M1接種到乳酸菌葡萄糖發(fā)酵培養基，40℃培養48h后，培養基由紫色變成黃色，德拉姆氏小管不產(chǎn)氣，取產(chǎn)酸不產(chǎn)氣的液體發(fā)酵液點(diǎn)樣做紙層析。同時(shí)點(diǎn)樣空白發(fā)酵液和2%   乳酸做對照。實(shí)驗結果見(jiàn)表 1 ．

表 1   M1 菌株葡萄糖發(fā)酵液紙層析實(shí)驗結果

由表 1可知，M1菌株葡萄糖發(fā)酵液遷移率 Rf =0.69，2%標準乳酸遷移率 R f=0.69，二者遷移率一致，說(shuō)明發(fā)酵產(chǎn)物中有乳酸。結合革蘭氏染色及菌體形態(tài)觀(guān)察結果，確定M1菌株為嗜熱乳酸鏈球菌。

2.4 M1菌株牛奶發(fā)酵結果

將活化的M1菌株接入滅菌的牛乳培養基中進(jìn)行牛奶發(fā)酵，冷藏24h后進(jìn)行風(fēng)味品評，實(shí)驗 結果見(jiàn)表 2 ． 

表 2   嗜熱乳酸鏈球菌發(fā)酵的酸奶品評結果

由實(shí)驗結果可知，M1菌株的凝乳時(shí)間較短，酸奶具有較好的口感和特有的脂香味，但其酸味不足。在實(shí)際生產(chǎn)中，嗜熱乳酸鏈球菌的主要作用是生成脂香味物質(zhì)，該菌株具有良好的產(chǎn)生脂香味物質(zhì)的能力，可以和保加利亞乳桿菌混合發(fā)酵生產(chǎn)酸奶． 

3   結論

( 1 ) 利用BCG牛乳培養基為分離培養基，采用涂布稀釋分離的方法，從酸奶中成功分離出嗜熱乳酸鏈球菌。因在BCG牛乳培養基中有溴甲酚紫( 一種酸堿指示劑) ，因而其在BCG牛乳培養基上的菌落顏色為黃色，很容易與不產(chǎn)酸的雜菌分開(kāi)，提高了分離效率。利用該方法分離嗜熱鏈球菌，菌落較大、菌落容易觀(guān)察，極大地提高了分離效率． 

( 2 ) 采用常規的革蘭氏染色、形態(tài)觀(guān)察和發(fā)酵產(chǎn)物紙層析實(shí)驗相結合的方法對分離到的菌株進(jìn)行簡(jiǎn)單鑒定，該方法操作簡(jiǎn)單、快速、實(shí)驗結果可靠． 

( 3 ) 分離到的嗜熱乳酸鏈球菌菌株經(jīng)活化后可以應用到生產(chǎn)中．

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