食源性致病菌檢測技術(shù)（13）

  副溶血性弧菌

    副溶血性弧菌根據菌體O抗原不同，現已有13個(gè)血清群。主要引起食物中毒。副溶血性弧菌進(jìn)入人體后會(huì )在消化道內迅速繁殖生長(cháng)，產(chǎn)生大量的腸毒素�；颊邥�(huì )出現劇烈腹痛、腹瀉、嘔吐和發(fā)熱，大多數患者會(huì )中度脫水。如果搶救不及時(shí)，患者會(huì )因為嚴重脫水而有生命危險。 

1．常規分離鑒定技術(shù)

    分離、鑒定：糞便、肛拭、嘔吐物、可疑中毒食物及相關(guān)的容器涂拭物等，采用直接分離與增菌分離進(jìn)行檢測。檢測方法參照何曉青（1991年）專(zhuān)著(zhù)進(jìn)行。副溶血性弧菌選擇性平板采用科瑪嘉顯色平板，其菌落特征較典型。副溶血性弧菌的定量監測方法�？蓞⒄找宰畲罂捎袛担�MPN）方法進(jìn)行測定。

    副溶血性弧菌鑒定方法包括生化鑒定、小鼠毒力試驗、神奈川（KP）試驗，KP很可能就是致病菌株。耐熱溶血素檢測，參照GB/T4789。7-2003，FDA等檢驗方法，通過(guò)以上鑒定技術(shù)，確定副溶血性弧菌及其毒力情況。  

    PCR檢測技術(shù)應用：副溶血性弧菌的耐熱溶血素及耐熱相關(guān)溶血素基因通過(guò)PCR擴增，在食源性疾病相關(guān)標本中直接檢測毒力基因，該方法具有快速簡(jiǎn)便的特點(diǎn)，為食源性疾病的快速診斷提高有效的依據。檢測副溶血性弧菌特有的基因片段（Pr72H）的方法，也可進(jìn)行鑒定是否為副溶血性弧菌。  

    血清抗體檢測：取急性及恢復期雙份血清做間接凝血試驗：取急性及恢復期雙份血清做間接凝血試驗，抗體效價(jià)呈4倍或以上增長(cháng)，即可確診。副溶血性弧菌抗體產(chǎn)生較早，一周之內可有明顯升高，以后迅速下降。  

2．流行病學(xué)分型技術(shù)

    血清分型技術(shù)：副溶血性弧菌可分為13個(gè)血清群及67個(gè)K抗原因子血清型。菌體須以121℃高壓滅菌1小時(shí)后進(jìn)行凝集試驗，近年來(lái)副溶血性弧菌流行的血清型以O3：K6為多見(jiàn)。  

    分子流行病分型技術(shù)：目前在副溶血性弧菌分子流行病學(xué)采用的方法有：PFGE、多重PCR、核酸體分型以及隨機擴增多態(tài)性核糖核酸技術(shù)（RAPD）等。

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