細菌呼吸酶類(lèi)試驗

1.氧化酶試驗  氧化酶或稱(chēng)細胞色素氧化酶，是細胞色素呼吸酶系統的終末呼吸酶。作氧化酶試驗時(shí)，此酶首先使細胞色素C氧化，然后氧化型細胞色素C再使對苯二胺氧化，產(chǎn)生顏色反應。本試驗腸桿菌科陰性，弧菌科、非發(fā)酵菌陽(yáng)性（除個(gè)別菌種外）、奈瑟菌屬均陽(yáng)性。

2.過(guò)氧化氫酶試驗  黃酶系統的呼吸酶最后把氫交給分子氧而形成過(guò)氧化氫，過(guò)氧化氫對活細胞有毒，過(guò)氧化氫酶的作用是使過(guò)氧化氫分解為分子態(tài)氧。于半分鐘內大量氣泡產(chǎn)生者為陽(yáng)性，不產(chǎn)生氣泡者為陰性。絕大多數細菌均可產(chǎn)生過(guò)氧化氫酶。但鏈球菌屬的觸媒陰性，金氏桿菌屬細菌的觸媒也陰性。

3.硝酸鹽還原試驗   硝酸鹽還原試驗包括兩個(gè)過(guò)程：其一是在合成代謝過(guò)程中，硝酸鹽還原為亞硝酸鹽和氨，再由氨轉化為氨基酸和細胞內其它含氮化合物；其次是在分解代謝過(guò)程中，硝酸鹽或亞硝酸鹽代替氧作為呼吸酶系統中的終末受氫體。硝酸鹽還原的過(guò)程可因細菌不同而異，大腸埃希菌等僅使硝酸鹽還原為亞硝酸鹽；假單胞菌等能使硝酸鹽或亞硝酸鹽還原為氮；有的細菌則可使其還原為亞硝酸鹽和離子態(tài)的銨。硝酸鹽或亞硝酸鹽如果還原生成氣體的終末產(chǎn)物如氮或氧化氮，就稱(chēng)為脫硝化或脫氮化作用。硝酸鹽還原試驗系測定還原過(guò)程中所產(chǎn)生的亞硝酸.接種硝酸鹽培養基后于35℃培養1~4d，將硝酸鹽還原試劑甲液和乙液的等量混合液（用時(shí)混合）0.1ml加于試管內，立即或10min內觀(guān)察結果。（1）出現紅色為陽(yáng)性。（2）如欲檢查有無(wú)氮氣產(chǎn)生，可于培養基內加1只小倒管（Durham管），如有氣泡產(chǎn)生，表示有氮氣生成。（3）如加入硝酸鹽還原試劑不出現紅色，需檢查硝酸鹽是否被還原，可于原試管內再加入少許鋅粉，如出現紅色表示硝酸鹽仍然存在。若仍不產(chǎn)生紅色，表示硝酸鹽已被還原為氨和氮。腸桿菌科細菌均能還原硝酸鹽為亞硝酸鹽，銅綠假單胞菌、嗜麥芽假單胞菌等可產(chǎn)生氮氣。

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