偽狂犬病病毒

偽狂犬病病毒（Pseudorabies virus）又稱(chēng)豬皰疹病毒Ⅰ型，屬于皰疹病毒科（Herpesviridae）皰疹病毒甲亞科（Alphaherpesvirinae）。它是引起多種家畜和野生動(dòng)物以發(fā)熱、奇癢及腦脊髓炎為主要癥狀的一種皰疹病毒。由于本病的臨床癥狀同狂犬病有類(lèi)似之處，曾被誤認為狂犬病，后來(lái)才起用了“偽狂犬病”這一病名。本病廣泛分布于世界各地。

一、生物學(xué)特性

本病毒呈圓形或橢圓形，為雙股DNA，20面體立體對稱(chēng)，位于核心無(wú)囊膜的病毒粒子直徑約110～150nm，位于胞漿內帶囊膜的成熟病毒粒子的直徑約180nm。衣殼殼粒的長(cháng)度約12nm、寬9nm，其空心部分的直徑約4nm.

二、抵抗力

本病毒是皰疹病毒中抵抗力比較強的一種，在畜舍內干草上的病毒，夏季存活30d，冬季達46d。病毒在pH4～9之間保持穩定。在50％甘油鹽水中保存的病料0～6℃下154d感染力僅輕度下降，保存到3年時(shí)仍具感染力。

三、抗原性

偽狂犬病病毒只有一個(gè)血清型，但毒株之間的毒力有強弱之分。本病毒與人的單純皰疹病毒、馬立克氏病病毒有微弱的交叉反應。病毒顆粒表面沒(méi)有血凝素抗原。

四、培養特性

（一）雞胚培養  病毒可通過(guò)多種途徑感染雞胚，適應后很容易連續傳代。雞胚感染后約4d，絨毛尿囊膜上產(chǎn)生灰白色痘樣病變，迅速侵入中樞神經(jīng)系統的所有部分，導致胚胎的頭蓋部突起。

（二）細胞培養  本病毒可在雞胚成纖維細胞，豬、綿羊、牛、兔、狗、貓、猴和馬的腎原代細胞，豬和牛的睪丸原代細胞，以及Hela、Hep-2、PK-15、BHK-21等傳代細胞中增殖。以豬、兔、狗的細胞和雞胚成纖維細胞最為敏感。感染細胞變圓，形成合胞體。毒株的毒力越強，合胞體形成越多。

五、致病性

本病毒可感染多種家畜、禽類(lèi)及野生動(dòng)物，引起發(fā)熱，劇烈發(fā)癢和急性腦脊髓炎癥狀。本病毒對小豬危害最嚴重，成年豬癥狀輕微，死亡很少，并常成為隱性帶毒者。豬不發(fā)生瘙癢，但母豬流產(chǎn)，產(chǎn)仔減少。不足15d的仔豬，通常在出現癥狀后12～24h內死亡。本病造成的損失與年齡成負相關(guān)性，成年豬很少死亡，而仔豬的死亡率可達到100％。

�；疾『笤谄つw的某部位出現狂癢是本病的基本特征。狗和貓的癥狀與牛相似，但不攻擊人和其他動(dòng)物，常在出現癥狀后24～36h死亡。山羊無(wú)瘙癢癥狀，主要表現不安、大量出汗、后期出現痙攣和麻痹。多在24～48h內死亡。人可能具有某種程度的易感性。

六、微生物學(xué)診斷

（一）病毒分離  在病的急性期，用棉拭子在口咽部取樣。病死動(dòng)物取扁桃體、頸淋巴結和鼻粘膜。收集局部水腫液和該區域的神經(jīng)干。部分采集脊髓和腦（最好是中腦、腦橋和延腦）。

1．雞胚接種  本病毒可適應雞胚，接種4d后，在絨毛尿囊膜上可見(jiàn)白色痘斑性病變，并迅速侵襲整個(gè)神經(jīng)系統，導致胚胎頭蓋骨突起。

2．動(dòng)物接種  病料皮下接種兔，能產(chǎn)生典型的瘙癢癥狀，2d后兔舐接種部位，以后更狂暴，啃咬皮膚。癥狀持續4～6h，兔臥地不起，陣發(fā)性痙攣和呼吸困難死亡。經(jīng)兔接種后的材料則可感染豚鼠和小白鼠，引起瘙癢癥狀。

3．細胞培養  豬腎傳代細胞系（如PK-15）以及豬、兔和牛的原代腎細胞培養最適于病毒的分離培養。將待檢的腦組織或扁桃體研磨成漿，用Hanks液或PBS液稀釋成10％懸液，經(jīng)2000r／min離心10min，取上清，接種長(cháng)成單層的細胞培養液內，37℃吸附1h，加維持液繼續培養。病變出現時(shí)間與樣品中病毒含量多少有關(guān)，最早可在接種后18h出現細胞病變，晚的則在96h以后，一般在接種后48h。此時(shí)，將細胞培養物作蘇木紫—伊紅染色，鏡檢可見(jiàn)嗜酸性核內包涵體。據報道，兔腎細胞培養對本病毒特別易感，高于雞胚和實(shí)驗動(dòng)物。

（二）血清學(xué)檢查

1．血清中和試驗  一般用乳兔腎細胞或PK-15細胞。病毒滴度不低于105TCID50／0.1ml，使用滴度在100～500TCID50范圍內。被檢血清作倍比稀釋。血清中和效價(jià)在1:2時(shí)可疑，1:4時(shí)為陽(yáng)性。

2．ELISA試驗  某些國家已把ELISA（間接法）作為診斷該病的標準方法。但該病毒的抗體與牛皰疹病毒Ⅰ型抗體有交叉反應。在同等條件下，用已接種病毒和空白細胞培養物分別制備病毒抗原和對照細胞抗原。如被檢血清在病毒抗原孔的吸收值較對照孔高0.15以上者判為陽(yáng)性。

3．熒光抗體試驗  采取新鮮病料，做冰凍切片進(jìn)行熒光抗體染色（間接法）檢查，該法比病毒分離更快速。

4．瓊脂擴散試驗  抗原用PK-15細胞系生產(chǎn)制備，待檢豬血清不稀釋?zhuān)?st1:chmetcnv w:st="on" UnitName="℃" SourceValue="25" HasSpace="False" Negative="False" NumberType="1" TCSC="0">25℃左右14～18h即可判定。但該方法尚需在實(shí)踐中進(jìn)一步驗證。

七、免疫與治療

本病尚無(wú)有效藥物治療，緊急情況下用高免血清治療，可降低死亡率。目前針對該病的弱毒苗、弱毒滅活苗、野毒滅活苗及基因缺失苗已研制成功，在許多流行地區應用，能有效減緩豬感染后的臨床癥狀，大大降低本病的發(fā)生，減少經(jīng)濟損失。但靠疫苗接種不能消滅本病，一般無(wú)本病豬場(chǎng)禁用疫苗。還有研究證明，當豬同時(shí)接種兩種不同的基因缺失疫苗后，病毒會(huì )發(fā)生基因重組現象，因此在同一個(gè)動(dòng)物體中只準使用一種基因缺失苗，以避免疫苗毒株間的重組。

上一篇：病毒的血球凝集及血球凝集抑制試驗

下一篇：豬繁殖與呼吸綜合征病毒