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組織培養
培養病毒的組織培養技術(shù)，都是下列5種基本方法的改良：
（一）懸浮細胞培養法（Snspended—cell method） 這是一個(gè)古老但現在仍在繼續
應用的方法，常用于口蹄疫病毒的培養。
（二）血漿凝塊培養法（Plasma—dot method） 應用凝固血漿（經(jīng)常是雞血漿）使組織塊貼附在玻片或試管壁上。先在玻璃表面涂布一層血漿膜，加入胚胎浸出液使其凝固。將組織塊置入這一基質(zhì)內，即能貼附于玻璃表面并增殖。應用這一方法可以看到細胞增殖，并可測量組織塊的生長(cháng)情況。這類(lèi)培養物中的病毒生長(cháng)，可根據下列幾種方法測知：
（a）取培養物的液體或細胞作為病毒樣品，接種于已知能發(fā)生感染的易感動(dòng)物；（b）注意其對細胞代謝的影響（亦即對某些代謝路徑的抑制）；（c）觀(guān)察細胞死亡（壞死）；（d）檢測是否有血凝素存在；（e）對細胞或提純的液體進(jìn)行電子顯微鏡檢查。
（三）單層細胞培養（Monolayer cell cultures） 靜止的試管培養是病毒學(xué)中最常用的方法。這些培養物是用胰酶分散的組織制備的（來(lái)自適用的特殊來(lái)源,如腎、睪丸、皮膚、腫瘤以及其他組織）。這種培養物內含有小的細胞團塊和單個(gè)細胞。將組織用剪刀剪碎，并用鹽水沖洗，除去血細胞和細胞碎屑后將其置于胰酶溶液內，并用磁力攪拌裝置不斷攪拌。當細胞分散時(shí)（具體時(shí)間隨胰酶消化的溫度和所用組織而不同），稍予離心沉淀，用營(yíng)養液沖洗2～3次，除去胰酶，用幾層紗布過(guò)濾后進(jìn)一步稀釋?zhuān)姑?SPAN lang=EN-US>m1中含有足夠量的細胞，以保證良好的生長(cháng)（細胞的具體數量隨細胞種類(lèi)而不同），并分裝培養于試管內。
由腎組織制備的細胞懸液能在靜置的任何玻璃表面（平皿或試管或玻璃瓶）產(chǎn)生豐盛的單層細胞。這樣制備的試管培養物可用于病毒的分離、滴定、中和試驗以及研究病毒在細胞內的生長(cháng)。
（四）直接培養（Direct cultures） 這種培養方法與單層細胞培養相同。在尸體剖檢時(shí)采取組織或者采取活體組織，用以制備單層細胞培養物，以提高病毒分離的機會(huì )，特別是在組織內的病毒可能很少或者因存在抗體而使病毒呈不活動(dòng)狀態(tài)時(shí)。應用的胰酶應盡可能少，因為有些病毒可被胰酶滅活。
（五）器官培養（Organ cultures） 用于接種可疑病毒材料的器官培養物，也可以如前所述那樣直接用病變組織制備。
現在最常用的是單層細胞培養，培養病毒以同種動(dòng)物細胞為佳（即牛的病毒用牛的細胞），以腎細胞較常用，胚胎細胞較幼年動(dòng)物的細胞好，幼年動(dòng)物的細胞又較成年動(dòng)物的細胞好。
細胞培養對玻璃器皿洗滌要求很高，徹底洗凈后用蒸餾水沖洗，再用雙餾水沖洗，干燥滅菌后備用。所有溶液均用雙蒸餾水配制，所用藥品試劑要用高質(zhì)量的分析純試劑。操作過(guò)程中，嚴格要求無(wú)菌。
