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目的要求
1. 通過(guò)觀(guān)察了解酵母細胞的形態(tài)結構。
2. 掌握鑒別酵母細胞死活的染色方法。
材料
1. 菌種：酵母菌菌懸液。
2. 染料：0.1％美蘭染色液。
3. 其他：顯微鏡、載玻片、蓋玻片、滴管、試管、蒸餾水等。
原理
酵母菌細胞較大，不必染色即可用顯微鏡觀(guān)察其形態(tài)。
用美蘭染色液可對酵母細胞進(jìn)行死活染色鑒別。美蘭是一種弱氧化劑，氧化態(tài)呈藍色，還原態(tài)呈無(wú)色�；畹慕湍讣毎�，因新陳代謝的不斷進(jìn)行，具有一定的還原能力，能將進(jìn)入細胞的美蘭還原，而細胞不被染色。因此，用美蘭對酵母細胞染色一定時(shí)間后，無(wú)色的為活細胞，呈藍色的則為死亡細胞。需要注意的是，一個(gè)活酵母菌的還原能力是一定的，必須嚴格控制染料的濃度和染色時(shí)間。
方法
1．酵母菌細胞形態(tài)的觀(guān)察
取潔凈的載玻片一塊，用滴管取酵母菌懸滴于載玻片中央，取蓋玻片一塊，小心地將蓋玻片一端與菌液接觸，然后緩慢地將蓋玻片放下，以避免產(chǎn)生氣泡。至此，一片酵母菌水浸標本片就制成了。
先用低倍鏡觀(guān)察，再用高倍鏡觀(guān)察，觀(guān)察時(shí)注意酵母細胞的形狀及出芽情況。
2．死活酵母細胞的染色鑒別
取0.1％美蘭液一滴，滴在一塊潔凈的載玻片中央，加一滴酵母菌懸液，混合均勻，染色3～5分鐘后加蓋玻片制成水浸標本片，鏡檢。
內容
1. 制片觀(guān)察所給各種酵母菌的細胞形態(tài)。
2. 用美蘭液對酵母菌死活細胞進(jìn)行染色鑒別。
結果與思考題
1. 繪圖表示所觀(guān)察的各種酵母菌，注明菌名及放大倍數。
2. 用美蘭對酵母細胞進(jìn)行染色鑒別時(shí)，為什么要控制染料的濃度和染色時(shí)間?
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