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    顯微鏡油浸系的使用及細菌基本形態(tài)觀(guān)察



    錄入時(shí)間:2011-8-2 15:02:59 來(lái)源:百度

    實(shí)驗一  顯微鏡油浸系的使用及細菌基本形態(tài)觀(guān)察
     
    目的要求
    1.正確掌握使用及護理顯微鏡的方法,特別是油浸系的使用及護理。
    2.認識細菌的基本形態(tài)和構造。
    操作步驟
    一、普通光學(xué)顯微鏡的構造
    普通光學(xué)顯微鏡包括機械部分和光學(xué)部分兩部分。機械部分包括鏡座、鏡臂、鏡筒、載物臺、物鏡轉換器、粗調節螺旋、細調節螺旋、標本夾等。光學(xué)部分包括接目鏡、接物鏡、反光鏡、光圈(虹采)、聚光鏡(集光器)等(圖1-1)。
     
    二、油浸系的原理
    浸系是在油浸鏡與標本之間加1滴香柏油,調整光源檢查細菌標本的方法。油浸鏡是一種高倍放大的物鏡,一般都刻有放大倍數,如95x、100x等。其鏡頭標記國產(chǎn)鏡多用“油”字表示,國外產(chǎn)品則用“Oil”(Oil Immersion)或HI(homogeneous Immersion)表示。而且油鏡的鏡身較高倍鏡和低倍鏡為長(cháng),鏡片最小,這也是識別的另一種標志。其使用原理是:由于香柏油與玻璃的折光率相似(香柏油為1.515,玻璃為1.52)。鏡檢時(shí),滴加香柏油的作用是使光源盡可能多的進(jìn)入物鏡中,避免光線(xiàn)通過(guò)折光率低的空氣(折光率為1.0)而散失,因而能提高物鏡的分辨率,使物像明亮清晰(見(jiàn)圖1-2)。
     
     
    三、使用方法
    鏡檢者需姿勢端正,一般用左眼觀(guān)察,右眼用于繪圖和記錄,兩眼同時(shí)睜開(kāi),以減少疲勞。光源用自然光線(xiàn)或人工光源,注意避開(kāi)直射日光。用人工光源時(shí),為了避免赤黃光線(xiàn),需在集光鏡下裝入藍色濾光片。

    圖1-2  顯微鏡油浸系的原理
    對光  將光圈完全開(kāi)放,升高聚光鏡與載物臺同高,置標本片于載物臺上,在低倍鏡下對光,用手轉動(dòng)反光鏡以調節之,至視野最亮時(shí)為止。若用天然光源宜用反光鏡平面,較弱光源用凹面。檢查未染色標本,光不宜太強,染色標本需強光。光線(xiàn)強弱可通過(guò)放大或縮小光圈、升降聚光鏡、旋轉反光鏡調節之。

    加油  將標本放在載物臺上,染色部位正對集光器的中央,用標本夾固定好,滴加香柏油1滴,用油浸鏡檢查,使油鏡頭浸入油滴中,幾乎與標本面接觸為度,然后由接目鏡注視鏡內,同時(shí)慢慢轉動(dòng)粗調節螺旋提起鏡筒(絕對不能下降鏡筒。┲聊苣:吹轿锵駮r(shí),再轉動(dòng)細螺旋(細螺旋轉動(dòng)一般不超過(guò)一周),直至物像清晰為止。
    四、顯微鏡的保護
    (一)從鏡箱內取顯微鏡時(shí),應以右手持鏡臂以水平方向慢慢抽出,不得碰鏡,再以左手托鏡座,保持鏡體平行,以防反光鏡及接目鏡滑落。
    (二)顯微鏡各鏡頭絕對不可用手指拭抹,應用擦鏡紙或用綢布輕拭之。油鏡用過(guò)后,立即用擦鏡紙拭之,若油漬已干,則需用擦鏡紙蘸二甲苯拭之,然后用干燥鏡紙輕拭之。鏡體可用軟布輕拭,以保持清潔。
    (三)用過(guò)后應將顯微鏡各部復位,尤其注意不要讓接物鏡對集光器,同時(shí)把集光器下降,以免發(fā)生碰撞,然后置鏡箱內鎖好。
    (四)注意防潮,勿靠近熱源及有腐蝕性的化學(xué)藥品。顯微鏡各零件不要任意拆卸,尤其是光學(xué)部分,以免損壞。
    五、細菌正常形態(tài)的觀(guān)察
    練習顯微鏡油浸系的使用,觀(guān)察已制好的細菌染色標本,如葡萄球菌、鏈球菌、四聯(lián)球菌、大腸桿菌、枯草桿菌、螺旋狀菌及細菌的莢膜、芽胞和鞭毛,并進(jìn)行繪圖。
     

     

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