支原體污染相關(guān)內容

國家　  受支原體污染(%)  報告年度

USA－FDA  15  1993(past 30 years)

USA－ATCC  15-20  1992

Japan－(IFO，RIKEN，JCR 80~30~22  1981 1987-19931998

Germany－DSM  36  1990-1994

Argentina  65  1987

Israel  32  1986-1993

China  95   1990

 

造成支原體高污染率的原因為： 

1.支原體size 0.1~0.8 um，無(wú)細胞壁，可透過(guò)一般過(guò)濾膜（0.22-0.45 um） 

2.支原體污染時(shí)，沒(méi)有明顯的肉眼或一般光學(xué)顯微鏡可觀(guān)察到的特征變化 

3.過(guò)去缺乏簡(jiǎn)單、快速且可靠的檢測方式 

4.細胞流通間缺乏品管，造成實(shí)驗室間的相互污染 

5.研究或操作人員忽略污染問(wèn)題 

 

1.  已受污染的細胞 

2.  操作人員的疏失 

3.  已受污染的培養基、血清 

4.  操作環(huán)境不良、實(shí)驗器具不潔等 

由于支原體為人體口腔中之正常菌叢，實(shí)驗室之操作人員的污染亦可能為污染源，須十分注意。而萬(wàn)一細胞已受支原體污染時(shí)，最佳的處理原則為將細胞高壓滅菌后丟棄，以免污染其它潔凈的細胞株。但是若是堅持要作去除支原體污染，有以下幾種方法，只不過(guò)結果會(huì )與原始的細胞特性有差異。

 

去除支原體污染： 

1. 抗生素處理：BM-cyclin（Roche），MRA（mycoplasma removal agent，ICN），Ciprofloxcin（Bayer），Enrofloxacin（Bayer） 

2. Nucleic acid metabolites：5-bromouracil，Hoechst 33258，bromodeoxyuridine 

3. Anti-sera 

 

 設備方面： 

1.  使用已作支原體測試ok之細胞株 

2.  于另一隔離之區域操作未知是否有支原體污染之細胞 

3.  使用不添加抗生素的培養基培養細胞 

 檢測方面：定期以標準的支原體檢測方法檢測細胞、培養基、血清、ddH2O有否被支原體污染。

 實(shí)驗操作人員之無(wú)菌觀(guān)念與無(wú)菌操作技術(shù)之要求