菌種保存及培養

 

一般用到大腸桿菌，金葡菌，黑曲霉，白色念珠球菌，生孢梭菌，枯草芽孢等，我們的目的是保藏一年，標準是買(mǎi)進(jìn)時(shí)是第二、三代，使用時(shí)不超過(guò)第五代。

 

方法：普通冰箱0度一下冷藏。先把買(mǎi)回來(lái)的二代菌在相應的培養基中培養分離，觀(guān)察菌落形態(tài)和做革蘭氏染色，確定是我們所需要的菌后，再事先準備好半固體瓊脂小管，接著(zhù)用接種環(huán)挑取菌落穿刺接種于瓊脂的斜面及高層，然后在覆蓋上事先準備好的滅過(guò)菌并干燥過(guò)的液體石蠟，約1CM。就可以冷藏了，有效期一年。

 

一般是制備12支，然后要用時(shí)在取出一支活化后劃線(xiàn)接種于瓊脂斜面，培養24小時(shí)候，冷藏在冰箱里，有效期一月，這個(gè)制備4支。這樣就能保證每周都有菌用了，使用時(shí)是第四代或第五代。

 

如果是第三代想用第四代的話(huà)，就可以把買(mǎi)回來(lái)的菌斜面跳過(guò)平板劃線(xiàn)形態(tài)及革蘭氏檢查（正規渠道買(mǎi)的菌一般還是可靠的），直接做半固體穿刺接種以后用液體石蠟封起來(lái)后冷藏（多做幾支）。使用時(shí)再活化后劃線(xiàn)于營(yíng)養瓊脂斜面，培養24小時(shí)，這時(shí)就可以挑取菌落使用了（第四代），有效期一個(gè)月(這個(gè)斜面制備4支冷藏，那么就可以每周使用一支了)。也就是說(shuō)石蠟管做了幾支就可以用幾個(gè)月，但最多是一年。