當環(huán)境溫度不適應果蠅生長(cháng)時(shí)(溫度低于18℃) ,培養基接種后的7d內,特別容易長(cháng)霉。
要避免長(cháng)霉,應注意:
①培養果蠅的器皿要嚴格消毒。培養瓶洗干凈后,自然涼干, 再與棉塞一道進(jìn)行高溫干燥滅菌(120℃, 30min) 。
②培養基營(yíng)養要全面。果蠅培養基的種類(lèi)很多,本實(shí)驗室用的是玉米培養基,配方如下:水750mL煮開(kāi),加瓊脂6. 2g,待瓊脂溶解后加白糖62.5g,攪拌溶解后加調成糊狀的玉米糊(玉米粉82. 5g,用冷水調成糊狀) ,煮開(kāi)2～3min,加酵母粉7g,加熱1～2min,攪拌均勻后,移去火源,加丙酸2mL (起殺菌防霉的作用) 。培養基稍稍冷卻后,倒入已滅菌的培養基瓶中,盡量不要讓培養基粘在瓶壁上,塞好棉塞,放入仍有余熱的干燥箱中將瓶壁上的水蒸干。
③接種時(shí)消好毒。在無(wú)菌室內接種, 如沒(méi)有無(wú)菌室, 在接種前用75%酒精棉球擦雙手一遍。接種后,放入適宜果蠅生長(cháng)溫度的培養箱中培養果蠅(溫度20～25℃) ,一旦下一代成蠅孵出來(lái)后,培養基就不易長(cháng)霉。
長(cháng)霉后的處理方法
若培養基長(cháng)霉后,由于霉菌孢子漂浮于培養瓶的整個(gè)空間,包括果蠅身上,如將此果蠅接種到新的培養基中,大約經(jīng)過(guò)4 ～5d,培養基將會(huì )重新長(cháng)出霉菌來(lái),遇到該問(wèn)題,解決的方法只有兩種:一是不再接種這種長(cháng)霉菌果蠅,重新接種未長(cháng)霉的果蠅;二是采取措施殺死果蠅身上的霉菌孢子。
殺霉菌方法為:將帶有霉菌孢子的成蠅倒入空培養瓶中,棉塞上倒適量的75%酒精,再將瓶口塞緊,利用酒精具有揮發(fā)性,揮發(fā)后的酒精充滿(mǎn)整個(gè)瓶?jì)?從而將果蠅身上的霉孢子殺死。
在操作上應注意兩點(diǎn):一是倒在棉塞上的酒精量要合適,過(guò)多果蠅易醉昏,過(guò)少殺死不了霉菌孢子;二是果蠅呆在空瓶?jì)鹊臅r(shí)間要恰當,以2d為好。
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