范圍:本法適用于濃縮果汁及濁汁中細菌總數的檢測。濃縮果汁通過(guò)濾膜過(guò)濾,細菌被截留,而后將濾膜置于細菌總數選擇性培養基中,培養確定細菌總數的數量。濁汁直接與平板計數培養基混合后培養來(lái)確定細菌總數的數量。
參考:GB/T 4789.2-2003
標準:無(wú)
試劑:
Millipore細菌總數選擇性培養基
平板計數瓊脂
乙醇(75%)
儀器器皿:
培養箱
凈化工作臺
滅菌Duran Schott 瓶
10毫升無(wú)菌移液管
Millipore過(guò)濾器
PALL 0.45μm濾膜
PALL 一次性無(wú)菌培養皿50×9mm,內置吸水紙
一次性無(wú)菌培養皿90×15mm,塑料
真空泵
菌落計數器
鑷子
酒精燈
漏斗
操作程序
全部工作應在已經(jīng)紫外線(xiàn)殺菌15分鐘及75%乙醇噴灑過(guò)的凈化工作臺上進(jìn)行。
1清汁的檢測
1.1用無(wú)菌移液管從無(wú)菌袋中吸取20mL果汁,置于盛有50mL滅菌水的樣品瓶中,充分混勻。將一瓶細菌總數選擇性培養基倒入50×9mm的一次性無(wú)菌培養皿內。
1.2用無(wú)菌鑷子夾取一個(gè)濾膜邊緣部分,正面向上置于滅菌過(guò)濾器上,將制備的樣品倒入漏斗內,打開(kāi)真空泵,當全部液體通過(guò)膜后,釋放真空,用鑷子把濾膜輕輕夾起,放于預備的培養皿內。
1.3將培養皿置于培養箱內,于30~35℃培養三天。
1.4全部的細菌總數用放大鏡計數。此數目除以20即得出每毫升果汁中的細菌菌群數。
2濁汁的檢測
2.1用無(wú)菌移液管吸取10mL已熱處理過(guò)的果汁,分別備5個(gè)無(wú)菌培養皿內各加入2mL果汁,向每一90×15mm的無(wú)菌培養皿中迅速傾入平板計數瓊脂約25mL,輕輕搖動(dòng),使果汁與培養基混合均勻。
2.2待培養基凝固后,將培養皿倒置放入培養箱內,于30-35℃培養三天。
2.3培養結束,進(jìn)行計數,以每10mL樣品報告結果。
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