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      首頁(yè) > 微生物知識->細菌基本知識和檢測方法->測定細菌數量的方法

    測定細菌數量的方法



    錄入時(shí)間:2011-6-21 14:10:14 來(lái)源:互聯(lián)網(wǎng)

      1、計數器測定法:
      即用血細胞計數器進(jìn)行計數。取一定體積的樣品細胞懸液置于血細胞計數器的計數室內,用顯微鏡觀(guān)察計數。由于計數室的容積是一定的(O.1mm3),因而根據計數器刻度內的細菌數,可計算樣品中的含菌數。本法簡(jiǎn)便易行,可立即得出結果。
      本法不僅適于細菌計數,也適用于酵母菌及霉菌孢子計數。
     
      2、電子計數器計數法:
      電子計數器的工作原理是測定小孔中液體的電阻變化,小孔僅能通過(guò)一個(gè)細胞,當一個(gè)細胞通過(guò)這個(gè)小孔時(shí),電阻明顯增加,形成一個(gè)脈沖,自動(dòng)記錄在電子記錄裝置上。
      該法測定結果較準確,但它只識別顆粒大小,而不能區分是否為細菌。因此,要求菌懸液中不含任何碎片。
     
      3、活細胞計數法
      常用的有平板菌落計數法,是根據每個(gè)活的細菌能長(cháng)出一個(gè)菌落的原理設計的。取一定容量的菌懸液,作一系列的倍比稀釋?zhuān)缓髮⒍康南♂屢哼M(jìn)行平板培養,根據培養出的菌落數,可算出培養物中的活菌數。此法靈敏度高,是一種檢測污染活菌數的方法,也是目前國際上許多國家所采用的方法。使用該法應注意:①一般選取菌落數在30~300之間的平板進(jìn)行計數,過(guò)多或過(guò)少均不準確;②為了防止菌落蔓延,影響計數,可在培養基中加入0.001%2,3,5一氯化三苯基四氮唑(TTC);③本法限用于形成菌落的微生物。
      廣泛應用于水、牛奶、食物、藥品等各種材料的細菌檢驗,是最常用的活菌計數法!
     
      4、比濁法
      比濁法是根據菌懸液的透光量間接地測定細菌的數量。細菌懸浮液的濃度在一定范圍內與透光度成反比,與光密度成正比,所以,可用光電比色計測定菌液,用光密度(OD值)表示樣品菌液濃度。
      此法簡(jiǎn)便快捷,但只能檢測含有大量細菌的懸浮液,得出相對的細菌數目,對顏色太深的樣品,不能用此法測定。
     
      5、測定細胞重量法
      此法分為濕重法和干重法。濕重法系單位體積培養物經(jīng)離心后將濕菌體進(jìn)行稱(chēng)重;干重法系單位體積培養物經(jīng)離心后,以清水洗凈放人干燥器加熱烘干,使之失去水分然后稱(chēng)重。
      此法適于菌體濃度較高的樣品,是測定絲狀真菌生長(cháng)量的一種常用方法。
     
      6、測定細胞總氮量或總碳量
      氮、碳是細胞的主要成分,含量較穩定,測定氮、碳的含量可以推知細胞的質(zhì)量。此法適于細胞濃度較高的樣品。
      以上是我知道的6種常用方法,其實(shí)測定微生物生長(cháng)的方法很多,各種方法均有其優(yōu)缺點(diǎn),也不是在任何情況下都適用。在微生物學(xué)工作中一般常用的是平皿菌落計數法、計數器法和比濁法。

     

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