常用的滅菌方法（2）

滅菌條件及驗證的基本要求

 

高壓蒸汽濕熱滅菌條件一般通常采用121℃×20min或116℃×40min的程序，也可采用其它溫度和時(shí)間參數�？傊�，必須保證物品滅菌后的SAL≤10-6�？傊�，必須驗證所采用的滅菌條件能達到無(wú)菌保證要求。在實(shí)際應用中，對熱穩定的產(chǎn)品或物品，可采用過(guò)度殺滅法菌，其SAL應≤10-1212。對熱極為敏感的產(chǎn)品，可的允許標準滅菌時(shí)間F0可低于8min。，但對F0低于8的滅菌程序要求應在生產(chǎn)全過(guò)程中，對產(chǎn)品中污染的微生物嚴加監控，并采取各種措施防止耐熱菌污染及降低微生物污染水平，以確保被滅菌滅菌產(chǎn)品達到無(wú)菌保證要求。滅菌物品的表面必須潔凈，不得污染有機物質(zhì)。必要時(shí)，外表應用適宜的包皮寬松的包裹，特別是燒瓶、試管等容器的塞子要防止脫落。滅菌柜內的物品裝載方式應保證滅菌蒸汽徹底穿透物品，且不影響蒸汽穿透速度和滅菌后的干燥程度。滅菌柜中的空氣應排空并被飽和蒸汽完全替代,以保證表壓與滅菌柜內壓力的一致。

 

采用濕熱滅菌時(shí)[d1] ，被滅菌物品應有適當的包裝和裝載方式，保證滅菌的有效性和均一性。

蒸汽滅菌法濕熱滅菌工藝驗證時(shí)，應進(jìn)行熱分布試驗、熱穿透試驗和生物指示劑驗證試驗。以確定滅菌柜空載及不同裝載時(shí)腔室里中的熱分布狀況及可能存在的冷點(diǎn)；在空載條件下，確認121℃時(shí)腔室的各點(diǎn)的溫度差值應≤±1℃、；使用插入實(shí)際物品或模擬物品內的溫度探頭，確認滅菌柜在不同裝載時(shí)，最冷點(diǎn)物品的標準滅菌時(shí)間（F0）達到設定的標準；用生物指示劑進(jìn)一步確認在不同裝載時(shí)冷點(diǎn)處的滅菌物品達到無(wú)菌保證水平。本法常用的生物指示劑為嗜熱脂肪芽孢桿菌孢子(Spores of Bacillus stearothermophilus)。

 

二、干熱滅菌法

本法系指物品于干熱滅菌柜、隧道滅菌器等設備中、利用干熱空氣達到殺滅微生物或消除熱原物質(zhì)的方法，在干熱滅菌柜、連續性干熱滅菌系統或烘箱等設備中進(jìn)行滅菌�？捎眠m用于耐高溫但不宜用蒸汽濕熱滅菌法滅菌的物品的滅菌，也是最為有效的除熱原方法之一，如玻璃器具、金屬制容器、纖維制品、固體試藥、液狀石蠟等均可采用本法滅菌。

 

干熱滅菌條件一般為160～170℃×120min以上、170～180℃×60min以上或250℃×45min以上，也可采用其它溫度和時(shí)間參數�？傊�，應保證滅菌后的產(chǎn)品其SAL≤10-6。干熱過(guò)度殺菌殺滅后產(chǎn)品的SAL應≤10-12，此時(shí)物品一般無(wú)需進(jìn)行滅菌前污染微生物的測定。干熱滅菌250℃ 45min的干熱滅菌也可除去無(wú)菌產(chǎn)品包裝容器及有關(guān)生產(chǎn)灌裝用具中的熱原物質(zhì)。

采用干熱滅菌時(shí)，被滅菌物品應有適當的包裝和裝載方式，保證滅菌的有效性和均一性。

用本法滅菌的物品表面必須潔凈，不得污染有機物質(zhì)，必要時(shí)外面應用適宜的包皮寬松包裹。配有塞子的燒瓶、試管等容器口應有金屬箔或紗布等包皮包裹，并用適宜的方式捆扎，防止脫落。干熱滅菌箱內物品排列不可過(guò)密，保證熱能均勻穿透全部物品。

 

干熱滅菌法驗證與蒸汽濕熱滅菌法相同，應進(jìn)行熱分布試驗、熱穿透試驗、生物指示劑驗證試驗或細菌內毒素滅活驗證試驗。以確認滅菌柜中的溫度分布應符合設定的標準、確定最冷點(diǎn)位置、確認最冷點(diǎn)標準滅菌時(shí)間（FH）能保證達到設定標準并達到SAL要求。常用的生物指示劑為枯草芽孢桿菌孢子(Spores of Bacillus subtilis)。細菌內毒素滅活驗證試驗是證明除熱原過(guò)程有效性的試驗。一般將不小于1000單位的細菌內毒素加入待去熱原的物品中，證明該去熱原工藝能使內毒素至少下降3個(gè)對數單位。細菌內毒素滅活驗證試驗所用的細菌內毒素一般為大腸桿菌內毒素（Escherichia coli endoxin）。驗證時(shí)，一般采用最大裝載方式。