呼吸系統感染的微生物檢查(2)

 

 

⑵分離培養與鑒定

 

①定量細菌培養：對痰標本或肺泡灌洗液進(jìn)行定量細菌培養，計算每毫升中不同種類(lèi)的細菌數（CFU/ml），并鑒定細菌。

 

 

②肺炎鏈球菌：肺炎鏈球菌在血平板上菌落為扁平、表面光滑、周?chē)�有草綠色溶血環(huán)，有的菌落中央塌陷，呈臍窩狀。該菌膽汁溶菌試驗陽(yáng)性、發(fā)酵菊糖、Optochin敏感試驗陽(yáng)性，小白鼠毒力試驗陽(yáng)性等。

 

③流感嗜血桿菌（Heamophilus influenzae）：將標本接種在巧克力選擇瓊脂平板上，放置含5%~10%CO２環(huán)境培養。細菌與金黃色葡萄球菌一起培養時(shí)有“衛星現象”（satellite phenomenon）。菌體為多形性革蘭陰性小桿菌。根據生長(cháng)需要Ｘ、Ｖ因子、生化反應鑒定細菌。

 

④軍團菌（Legionella）：標本接種在活性炭酵母浸膏培養基上（BCYE）培養，只能在BCYE培養基上生長(cháng)的革蘭陰性桿菌（不易著(zhù)色），結合生化反應和血清學(xué)分型鑒定細菌。

 

⑤結核分枝桿菌：痰液或支氣管肺泡灌洗液經(jīng)處理雜菌后接種培養。（與尿結核菌培養方法相同）。

 

⑥肺炎支原體（Mycoplasma pneumonia）：肺炎支原體對營(yíng)養要求比較高，培養基中需加入小牛血清和新鮮酵母液等。將采集的咽拭子標本、支氣管分泌物、鼻咽洗液、痰等標本接種于液體和固體選擇培養基中培養１～２周，結合菌落生長(cháng)特性和生化反應鑒定。因肺炎支原體培養時(shí)間長(cháng)而且陽(yáng)性率很低，臨床常采用血清學(xué)或分子生物學(xué)方法檢測。

 

⑦肺炎衣原體和呼吸道合胞病毒、腺病毒、流感病毒等不同病毒需選擇不同的敏感細胞株進(jìn)行培養。

 

4、臨床意義

 

⑴病毒感染：流感病毒、副流感病毒、呼吸道合胞病毒、腺病毒、鼻病毒和冠狀病毒等為呼吸道感染的常見(jiàn)病毒，免疫功能低下者如嬰幼兒、老年人、癌癥患者、器官移植病人等易發(fā)生感染。引起嚴重急性呼吸綜合征（SARS）的新型冠狀病毒在2003年的流行中，中青年感染者居多。不同種類(lèi)病毒引起的臨床表現和造成的嚴重程度不同，如較重者患有急性和慢性支氣管炎、毛細支氣管炎和急性肺炎。甲型流感病毒易發(fā)生變異，新變異株除散發(fā)流感外，還引起爆發(fā)流行。近年，巨細胞病毒（CMV）引起的肺炎有增加趨勢。病毒性肺炎嚴重者發(fā)生死亡。

 

⑵細菌感染：下呼吸道細菌感染是導致病人死亡的一個(gè)主要原因。臨床常見(jiàn)感染有急性和慢性氣管炎、支氣管炎、肺炎、肺膿腫、胸腔膿腫、肺結核病等。常見(jiàn)感染細菌有肺炎鏈球菌、金黃色葡萄球菌、卡他布蘭漢菌、銅綠假單胞菌、產(chǎn)ESBL大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌、沙雷菌、不動(dòng)桿菌、流感嗜血桿菌等。肺膿腫常常伴有厭氧菌感染，偶見(jiàn)奴卡菌或放線(xiàn)菌感染。嗜肺軍團菌肺炎及其小型爆發(fā)，國內有不少報道。近年，結核病有回升趨勢，而且結核分枝桿菌多重耐藥菌株也不斷增加，全球每天約有8000人死于結核病，世界衛生組織已將結核病作為重點(diǎn)控制的傳染病之一。此外，非結核分枝桿菌感染有增多趨勢。白喉棒狀桿菌引起傳染病白喉（diphtheria），細菌在咽部粘膜上繁殖，形成白色偽膜，繼而發(fā)生在喉部或氣管內，容易造成窒息死亡。目前，該病幾乎絕跡。

 

由于病人自然咳出的痰容易被口腔正常菌群污染，痰培養生長(cháng)的細菌，有時(shí)難以評價(jià)是否有臨床意義，通過(guò)對痰質(zhì)量的評定和定量細菌培養，尚有一定的參考價(jià)值。當痰細菌計數≥106CFU/ml或經(jīng)纖維支氣管鏡、人工氣道吸引采集的下呼吸道分泌物細菌計數≥105CFU/ml、支氣管肺泡灌洗液細菌計數≥104CFU/ml和防污染支氣管肺泡灌洗液（PBAL）細菌計數≥103CFU/ml時(shí)，具有臨床診斷意義。

 

⑶真菌感染：免疫功能低下者如白血病病人和其他長(cháng)期應用抗菌素治療的重癥病人，容易引起真菌性肺炎。病原真菌常以白念珠菌為主，其他可見(jiàn)曲霉菌、毛霉菌、組織胞漿菌等。AIDS患者易發(fā)生卡氏肺孢子菌（pneumocystis carinii）感染。

 

⑷支原體感染：肺炎支原體是人類(lèi)原發(fā)性非典型肺炎（primary atypical pneumoniae, PAP）的主要病原體之一，肺炎支原體主要經(jīng)飛沫傳播，可導致疾病的流行，兒童及青少年多見(jiàn)發(fā)病。

 

⑸衣原體感染：肺炎衣原體(Chlamydia pneumonia)在人之間通過(guò)飛沫傳播，引起支氣管炎、肺炎等，兒童和青少年容易感染，感染率為10%左右。我國成人肺炎衣原體抗體陽(yáng)性率高達50%左右。鸚鵡熱衣原體肺炎是由于人接觸鳥(niǎo)類(lèi)而感染。新生兒沙眼衣原體肺炎多因其在分娩過(guò)程中感染所致。