細菌內毒素檢測及臨床應用(1)

 

一 細菌內毒素定量檢測法應用與發(fā)展

 

近10年，人們對疾病病因、病理的認識不斷深化，發(fā)現了許多疾病與內毒素的關(guān)系。由于很小劑量的內毒素即能引起極廣泛的生物作用及病理作用，因而加強內毒素的檢測研究便成為臨床、公衛及藥檢等領(lǐng)域的重要課題。

　　細菌內毒素檢查法又稱(chēng)鱟試驗法，它是1964年由美國學(xué)者Levih和Bang發(fā)現，并在1968年正式建立的一種定性或定量檢測微量細菌內毒素的分析方法。該法具有靈敏度高、特異性強和操作簡(jiǎn)便快捷的特點(diǎn)，不僅在藥學(xué)，而且在微生物學(xué)及臨床檢驗等領(lǐng)域應用較為廣泛。1973年，美國食品藥品管理局承認鱟制劑是一種生物制劑。1980年，美國藥典首先收載此法，其后英、德、意、日等國相繼收載了這一檢查方法。1983年我國衛生部檢驗地帶網(wǎng)授權中國藥品生物制品檢定所組織全國范圍的大輸液及放射性藥品鱟試驗檢查方法。1995年，中國藥典收載了修訂后的細菌內毒素檢查法，并取消了原熱原檢查。2003年，對細菌內毒素定量檢測開(kāi)始在我國臨床全面開(kāi)展應用。 www.labdd.com

　　鱟試驗法可廣泛用于革蘭氏陰性菌感染的快速診斷，可對患者的血液、尿液及腦脊液進(jìn)行直接檢查，有助臨床醫生及時(shí)發(fā)現內毒素疾病，以迅速采取果斷的治療。在公共衛生方面，鱟試驗法可對水源、食物、飲料等進(jìn)行內毒素測定，以便將其控制在規定水平以下，預防疾病，保障人民健康。用此法檢測藥品和生物制品等開(kāi)展較早，如美國收載檢測品種已上升為600多個(gè)。而且國外用此法檢測醫療用具中內毒素污染含量的研究進(jìn)行的比較深入。

　　據有關(guān)資料，正常人血中內毒素濃度為：＜0.1EU/ml，超過(guò)此值即可診斷為內毒素血癥。

　　許多研究表明，內毒素與多種疾病密切相關(guān)，內毒素血癥多隨病情惡化而加重，隨病情緩解而減輕。因此內毒素可以作為一個(gè)衡量病情和判斷預后的參考指標，也可用于臨床治療及判定療效或篩選恰當藥物的指標之一。

 

二 血液中細菌內毒素微量測定與臨床意義

 

自1968年Levin和Bang發(fā)現并建立鱟試驗方法以來(lái)，逐漸得到臨床和藥檢部門(mén)的重視。尤其是在臨床檢驗方面的應用更是飛速發(fā)展。隨著(zhù)鱟試驗方法研究和測定儀器的不斷完善，內毒素測定已由最初的定性凝膠法向靈敏度更高的微量定量方面發(fā)展。目前，在日本以合成基質(zhì)法為中心的血漿內毒素測定變得更快速，準確，更加使用于臨床各種感染癥狀的診斷。

 

據國外文獻報道：正常人血漿檢驗地帶網(wǎng)中的內毒素水平一般在0.1EU/ml左右，然而由于前處理方法及測定原理的不同其值也存在著(zhù)一定差異。隨著(zhù)血液前處理方法的標準化和國內血液前處理液的生產(chǎn)，我國臨床內毒素的定量動(dòng)態(tài)檢測水平將會(huì )提高，內毒素儀器的定量檢測的標準化進(jìn)程將會(huì )加速。

研究表明：內毒素血癥多隨病情惡化而加重，隨病情緩解而減輕。因此內毒素可以作為衡量病情和判斷預后的一個(gè)參考指標，也可用于指導臨床治療、判斷療效和篩選恰當的藥物。

目前應用鱟試驗陽(yáng)性對內毒素血癥進(jìn)行診斷，以鱟試驗濁度法或基質(zhì)顯色法測定，血漿內毒素濃度大于0.1EU/ml為定量標準，并證實(shí)它對革蘭氏陰性菌敗血癥的判斷優(yōu)于血培養。應用該法探討不同疾病的內毒素血癥發(fā)病率，結果為急性肝炎37%～64%，爆發(fā)性肝炎為58%～100%，且腹水與無(wú)腹水有顯著(zhù)差異。

膽石癥伴或不伴感染均有不同程度的內毒素臨床表現，在急性梗阻性化膿性感染時(shí)，內毒素血癥發(fā)生率最高（85%），而陰性?xún)H占21%，且內毒素病員低血壓與死亡率是革蘭氏陽(yáng)性菌血癥的2倍。

Nachum等應用尿液稀釋凝膠法研究了1286例尿路感染病例發(fā)現：鱟試驗區分顯著(zhù)性和非顯著(zhù)性菌尿癥的能力為93%。國內不斷尿路感染時(shí)，尿液內毒素濃度大于0.1EU/m為84%，而非感染者僅為2.3%。

 

早期診斷是多器官功能衰竭預防與救治的關(guān)鍵。一些實(shí)驗表明，血漿水平的陽(yáng)性預測值頗高，有些學(xué)者提出內毒素水平對多功能衰竭的監測有預警意義，動(dòng)態(tài)觀(guān)測其變化有助于早期診斷與預防。除此以外，內毒素與急重癥疾病、呼吸系統疾病、消化系統疾病、心血管系統疾病、口腔系統疾病、泌尿系統疾病等有著(zhù)密切關(guān)系，定量動(dòng)態(tài)檢測內毒素有助于疾病的早期診斷和治療。

標本采集注意事項：選擇患者沒(méi)有接受靜脈治療的時(shí)刻；靜脈全血的量一定不能超過(guò)1ml；標本采集完畢后建議2～8℃冷藏保存，時(shí)間不宜超過(guò)4h；