玻片法凝固酶陽(yáng)性葡萄球菌的再鑒定

 

 

為進(jìn)一步弄清玻片法對葡萄球菌血漿凝固酶試驗鑒定的準確性，我們收集了玻片法結果陽(yáng)性的葡萄球菌118株，按Kloos等［1］分類(lèi)方法進(jìn)行詳細鑒定與分類(lèi)，結果報告如下。

　　1　材料與方法

 

　　1.1　菌株來(lái)源　菌株分離于1996年8月～1997年12月我院住院及門(mén)診患者各類(lèi)標本中，計118株。標準菌株ATCC 25923由天壇生物制品檢定所提供。

　　1.2　菌種鑒定方法　將經(jīng)玻片法凝固酶試驗鑒定的、經(jīng)純化培養后保存于瓊脂斜面的“金葡菌”118株，傳代培養，按照Kloos等［1］方法再鑒定。

　　2　結果

　　2.1　菌種鑒定結果　金黃色葡萄球菌23株，中間型葡萄球菌28株，表皮葡萄球菌19株，溶血葡萄球菌15株，里昂葡萄球菌9株，人葡萄球菌7株，耳葡萄球菌7株，華納葡萄球菌3株，其余是腐生葡萄球菌和柯氏葡萄球菌7株，共10種。

　　2.2　玻片法凝固酶重復試驗結果　在限時(shí)操作的10秒種內，呈陽(yáng)性反應者，23株金黃色葡萄球菌中有22株，28株中間型葡萄球菌中有25株，陽(yáng)性反應準確率為92.16%(47／51)�！　�2.3　菌種與樣品來(lái)源關(guān)系的觀(guān)察，見(jiàn)表1。

表1　不同臨床標本葡萄球菌的分離情況

　　2.4　β-內酰胺酶測試結果　采用酸測定法。同時(shí)用大腸埃希菌ATCC 35218及金黃色葡萄球菌ATCC 25923為質(zhì)控菌株。118株葡萄球菌中，產(chǎn)酶株有61株，占51.69%。在產(chǎn)酶株中，以中間型葡萄球菌產(chǎn)酶率最高，占85.71%(24／28）。

　　2.5　抗生素敏感試驗結果　10種葡萄球菌對12種抗生素耐藥性相差不大，除對萬(wàn)古霉素、丁胺卡那霉素以及加酶抑制劑的抗生素敏感外，對其余抗生素敏感性均較低。

 

　　3　討論

　　為防止玻片法檢測血漿凝固酶試驗假陽(yáng)性反應，必須嚴格按《全國臨床檢驗操作規程》［2］進(jìn)行操作，即在10秒內|檢驗地帶網(wǎng)|完成此試驗。本室以前將此實(shí)驗延時(shí)1～2分鐘觀(guān)察，致使假陽(yáng)性率高達56.78%(67／118）。同時(shí)，為防止假陽(yáng)性反應，還必須做試管法血漿凝固酶試驗，以免“游離”的凝固酶漏檢。

 

　　凝固酶陽(yáng)性的葡萄球菌可分為金黃色葡萄球菌、中間型葡萄球菌和家畜葡萄球菌。因此凝固酶試驗陽(yáng)性者不能定為金黃色葡萄球菌，必須再進(jìn)行有關(guān)生化試驗如耐熱DNA酶、β-半乳糖苷酶，方可正確鑒定。

　　參考文獻

　　1　Kloos W E,Lambe D W.Staphylococcus.In:Albert B.ed,Manual of Clinical microbiol.5 th ed.Washington:American society for microbol,1991.222

　　2　葉應嫵，王毓三主編.全國臨床檢驗操作規程.第二版.南京：東南大學(xué)出版社，1997.553～569