幽門(mén)螺桿菌及其實(shí)驗室鑒定(2)

 

 

2．臨床意義

 

HP有較強的鞭毛動(dòng)力和對胃黏膜/黏液有較強的黏附力，使HP能在接近中性的黏膜層中定植，產(chǎn)生強活性的尿素酶，分解尿素，在菌體周?chē)�形成保護性氨環(huán)境，以抵抗胃黏膜上皮細胞分泌的胃酸；HP產(chǎn)生的蛋白酶能有效分解黏液蛋白，提供營(yíng)養。

 

HP在胃內定植后，通過(guò)對胃黏膜上皮細胞的黏附性、胃腸激素的作用、細胞壁脂多糖中脂質(zhì)A的致炎作用、產(chǎn)生多種酶（包括：尿素酶、蛋白酶、過(guò)氧化氫酶、脂酶和磷脂酶等）以及產(chǎn)生的細胞毒素等等，這些因素的共同作用導致臨床疾病的發(fā)生。在臨床上主要引起消化性潰瘍（十二指腸潰瘍、胃潰瘍）、慢性活動(dòng)性胃竇炎等，長(cháng)期感染易發(fā)展為萎縮性胃炎、胃腺癌和胃黏膜淋巴組織淋巴瘤。

3．微生物學(xué)檢驗

 

（1）檢驗程序。

（2）標本采集多部位采集胃、十二指腸黏膜標本，標本要新鮮，保持濕潤，置2ml無(wú)菌等滲鹽水中保存，在運送途中不超過(guò)3h，在4℃下最多保存5h。流行病學(xué)調查和檢測治療效果時(shí)可取血清檢查。

（3）檢驗方法

 

1）顯微鏡檢查 ①直接鏡檢：取胃、十二指腸黏膜活檢標本作革蘭染色，在油鏡下查找細長(cháng)彎曲或呈海鷗展翅狀排列的菌體；由于涂片是在HP定植部位的黏膜進(jìn)行觀(guān)察，陽(yáng)性率很高，是簡(jiǎn)便、實(shí)用、準確和較快速的診斷方法；②組織學(xué)切片：可行Warthin-Starry銀染色、改良Giemsa染色、甲苯胺藍染色、石炭酸復紅染色等。

2）分離培養 用含5％綿羊血的布氏瓊脂或加入7％馬血的心腦浸液作為非選擇性培養基，用改良的Skirrow瓊脂（加入萬(wàn)古霉素10mg/L、兩性霉素B10mg/L、甲氧芐啶5mg/L）作為選擇性培養基，在含5％O2、10％CO2、85％N2的微需氧環(huán)境中37℃孵育3～5天，長(cháng)出細小、灰白色、半透明、不溶血的菌落。

 

3）快速檢查 ①快速脲酶試驗：取一小塊新鮮活檢標本置于含尿素的培養基中，由于幽門(mén)螺桿菌產(chǎn)生大量的細胞外尿素酶（相當于普通變形桿菌的20～70倍），可分解尿素產(chǎn)大量的氨，使培養基pH升高，指示劑變色，能在5min~30min內檢測出幽門(mén)螺桿菌；這是一種簡(jiǎn)便實(shí)用、快速靈敏且較為準確的檢測Hp方法，適合胃鏡檢查的病人；②核素標記試驗：本試驗的敏感性和特異性均很高，但操作起來(lái)稍繁瑣；③PCR：是一種高度敏感和特異的方法，但由于實(shí)驗條件要求較高，目前僅用于實(shí)驗研究；④抗原檢測：可用已有的商品化試劑盒，用ELISA法直接檢測HP的菌體抗原。

 

4）鑒定 本菌的鑒定主要通過(guò)典型的菌體形態(tài)，生長(cháng)緩慢，僅于37℃生長(cháng)。氧化酶和觸酶陽(yáng)性，脲酶強陽(yáng)性，對萘啶酸耐藥，對頭孢噻吩敏感，在1％甘油和1％膽鹽中均不生長(cháng)。具體生化特征見(jiàn)表13-2。

4．耐藥性 HP對多粘菌素、三甲氧芐氨嘧啶、磺胺、萬(wàn)古霉素和萘啶酸天然耐藥。在體外藥敏試驗中，HP對許多抗生素都很敏感，但體內用藥效果并不滿(mǎn)意，主要因為HP寄生在黏液層下的胃上皮細胞表面，抗生素不能滲入胃黏膜深層。臨床上治療HP的藥物有阿莫西林、甲硝唑、克拉霉素、四環(huán)素、呋喃唑酮等。