埃希菌屬及其實(shí)驗室鑒定

 

     （一）埃希菌屬概念

　　埃希菌屬包括5個(gè)種，即大腸埃希菌、蟑螂埃希菌、弗格森埃希菌、赫爾曼埃希菌和傷口埃希菌。臨床最常見(jiàn)的是大腸埃希菌。

　　大腸埃希菌俗稱(chēng)大腸桿菌，大多數菌株是人類(lèi)和動(dòng)物腸道正常菌群。

 

     （二）生物學(xué)特性（性狀）

　　1.形態(tài)與染色：為革蘭陰性短桿菌，（1.0～3.0）μm×（0.4～0.7）μm.多數有周鞭毛，能運動(dòng)。有菌毛、莢膜及微莢膜。

　　2.培養特性：兼性厭氧菌，營(yíng)養要求不高，在普通營(yíng)養肉湯中呈渾濁生長(cháng)。普通營(yíng)養瓊脂上呈灰白色的光滑型菌落。血瓊脂平板上，少數菌株產(chǎn)生溶血環(huán)。在伊紅美藍瓊脂上，由于發(fā)酵乳糖，菌落呈藍紫色并有金屬光澤。麥康凱和SS瓊脂中的膽鹽對其有抑制作用，耐受菌株能生長(cháng)并形成粉紅色菌落。

　　3.生化反應：吲哚、甲基紅、V-P、枸櫞酸鹽試驗（IMViC試驗）為++--（腸桿菌屬多為--++）�？耸想p糖鐵瓊脂（KIA）上斜面和底層均產(chǎn)酸產(chǎn)氣，H2S陰性。動(dòng)力、吲哚、尿素（MIU）培養基的生化反應為++-.

　　4.抗原結構：大腸埃希菌的抗原由菌體抗原（O）、表面抗原（K）和鞭毛抗原（H）三種構成�，F已知有171種O抗原，100種K抗原和56種H抗原。一個(gè)菌株的抗原類(lèi)型由特殊的0、K和H抗原的代碼表示，其血清型別的方式是按O:K:H排列，例如O111:K58（B4）:H2.

 

 

　�。ㄈ�）致病性

 

　　主要是侵襲力、內毒素、腸毒素等致病因素引起各種炎癥（如膽囊炎、泌尿系感染、肺炎、新生兒腦膜炎、傷口感染、菌血癥及腹瀉等）。內毒素還可引起發(fā)熱、休克、DIC等。

 

　　1.腸道外感染：主要由正常菌群條件致病，以泌尿系統感染常見(jiàn)，高位嚴重尿道感染與特殊血清型大腸埃希菌有關(guān)。如菌血癥、膽囊炎、腹腔內膿腫

 

　　2.腸道感染：致病性大腸埃希菌有下列五個(gè)病原群。

 

　�。�1）腸產(chǎn)毒型大腸埃希菌（ETEC）：引起霍亂樣腸毒素腹瀉（水樣瀉）。

 

　�。�2）腸致病型大腸埃希菌（EPEC）：主要引起嬰兒腹瀉。

 

　�。�3）腸侵襲型大腸埃希菌（EIEC）：可侵入結腸黏膜上皮，引起志賀樣腹瀉（能產(chǎn)生粘液膿血便）。

　�。�4）腸出血型大腸埃希菌（EHEC）：又稱(chēng)產(chǎn)志賀樣毒素（VT）大腸埃希菌（SLTEC或UTEC），其中O157：H7可引起出血性大腸炎和溶血性尿毒綜合征（HUS）。臨床特征為嚴重的腹痛、痙攣，反復出血性腹瀉，伴發(fā)熱、嘔吐等。嚴重者可發(fā)展為急性腎衰竭。

 

　�。�5）腸粘附（集聚）型大腸埃希菌（EAggEC）：也是新近報道的一種能引起腹瀉的大腸埃希菌。

 

　　3.CDC將大腸埃希氏菌O157：H7列為常規檢測項目

　　EHEC的血清型>50種，最具代表性的是O157：H7.在北美許多地區，O157：H7占腸道分離病原菌的第二或第三位，是從血便中分離到的最常見(jiàn)的病原菌，分離率占血便的40%，6、7、8三個(gè)月O157：H7感染的發(fā)生率最高。且0157是4歲以下兒童急性腎功衰的主要病原菌，所以CDC提出應將大腸埃希氏菌0157：H7列為常規檢測項目。

 

      （四）微生物學(xué)檢驗

 

　　1.標本采集：腸道感染可采集糞便；腸道外感染可根據臨床感染情況采集中段尿液、血液、膿汁、膽汁、腦脊液、痰、分泌液等。

 

　　2.檢驗方法及鑒定

　�。�1）涂片與鏡檢：膿汁及增菌培養物發(fā)現單一革蘭陰性桿菌，可初步報告染色、形態(tài)、性狀供臨床用藥參考。

　�。�2）分離培養：糞便標本可用弱選擇鑒別培養基進(jìn)行分離，膿汁等可用血平板分離，取可疑菌落進(jìn)行形態(tài)觀(guān)察及生化反應。

　�。�3）鑒定

　　1）初步鑒定：根據菌落特征，涂片染色的菌形及染色反應，取純培養物作生化反應。凡符合KIA：A／A或K／A、產(chǎn)氣或不產(chǎn)氣、H2S-；MIU：動(dòng)力+或-、吲哚+、脲酶-；氧化酶-，IMViC：++--，可鑒定為大腸埃希菌。

　　2）致病性大腸埃希菌：

　　EPEC的鑒定：

　　EIEC的鑒定：應與志賀菌相鑒別，兩者的主要鑒別試驗可用醋酸鈉和葡萄糖銨利用試驗及粘質(zhì)酸鹽產(chǎn)酸三種試驗。大腸埃希菌均為陽(yáng)性，而志賀菌均為陰性。

　　ETEC毒素的檢測：采用改良Elek法測定LT并采用乳鼠胃內灌注法檢測ST.

 

 

　　EHEC的血清學(xué)鑒定：

 

　　EAEC的鑒定：檢測細菌對HEP-2細胞或Hela細胞的粘附性。

腸道外感染，經(jīng)涂片染色，分離培養后，生化鑒定到種；由于大腸埃希菌是超廣譜β-內酰胺酶（ESBLs）的主要產(chǎn)酶株，該酶由質(zhì)粒介導。對ESBLs產(chǎn)酶株所致感染需要采用碳青酶烯類(lèi)或內酰胺類(lèi)抗生素／酶抑制劑或頭霉菌素類(lèi)進(jìn)行治療。腸道內感染還需做血清分型、毒素測定或毒力試驗。食物、飲料、水等衛生細菌學(xué)檢查，主要進(jìn)行大腸菌群指數檢測。