臨床病原體檢查的常用方法（3）

㈢其他病原體感染的檢查

 

     1、真菌感染的檢查

 

     真菌（fungus）為真核細胞微生物，按形態(tài)可分為單細胞和多細胞兩大類(lèi)。單細胞真菌對人體有致病性的主要有新生隱球菌和白念珠菌。多細胞真菌有菌絲（hypha）和孢子(spore)，菌絲伸長(cháng)分支并交織成團，又稱(chēng)霉菌。淺部真菌，如皮膚癬菌感染，直接涂片顯微鏡檢查可見(jiàn)菌絲及孢子，可簡(jiǎn)便、快捷地作出初步診斷。真菌的培養要求低、在普通培養基（如沙氏培養基）上能生長(cháng)，但真菌繁殖一代時(shí)間較長(cháng)，分離培養至少需要4周。根據真菌培養的菌落形態(tài)、菌絲和孢子、染色特點(diǎn)、生化反應可以進(jìn)行鑒定。真菌的抗原檢測可檢查血清和腦脊液中隱球菌、念珠菌及假膜組織胞漿菌感染。分子生物學(xué)診斷在真菌感染的檢查中應用較少，PCR與基因探針技術(shù)聯(lián)合用于卡氏肺孢子菌感染的診斷有一定意義。

 

 

     2、寄生蟲(chóng)感染的檢查

 

 

     檢查出寄生蟲(chóng)病原體是確診寄生蟲(chóng)感染性疾病的最直接依據。根據不同種類(lèi)的寄生蟲(chóng)感染人體后的不同發(fā)育階段和寄生部位，采集相應的標本，如血液、糞便、陰道分泌物、骨髓等，涂片檢查蟲(chóng)卵、蟲(chóng)體、包囊等是目前最可靠的確診方法。例如，血涂片檢查瘧原蟲(chóng)，糞便涂片檢查各種蠕蟲(chóng)卵、腸道原蟲(chóng)的滋養體和胞囊，陰道分泌物涂片檢查陰道毛滴蟲(chóng)滋養體。部分較大的蟲(chóng)體，如蛔蟲(chóng)、絳蟲(chóng)節片等肉眼可以識別。分離培養極少用，在阿米巴或弓形體感染時(shí)有一定意義。

 

     3、螺旋體感染的檢查

 

 

     螺旋體（spirochete）是一類(lèi)細長(cháng)、柔軟、彎曲呈螺旋狀、運動(dòng)活潑的原核細胞型微生物。臨床標本涂片在暗視野顯微鏡下觀(guān)察到螺旋體的特殊形態(tài)和運動(dòng)狀態(tài)。例如，懷疑為梅毒患者的生殖器分泌物涂片，若暗視野顯微鏡下觀(guān)察到有胞體細長(cháng)、運動(dòng)活潑、由8～14個(gè)密螺旋組成的螺旋體時(shí)，有助于梅毒的診斷。除鉤端螺旋體外，其他螺旋不易分離培養，使鑒定較為困難。分子生物學(xué)診斷螺旋體感染有一定意義，用PCR擴增可檢出10條以上的鉤端螺旋體。

 

     4、支原體感染的檢查 

 

    支原體（mycoplasma）是一類(lèi)缺乏細胞壁、高度多形性的最小原核細胞型微生物。革蘭染色時(shí)支原體不易著(zhù)色，直接涂片檢查無(wú)臨床診斷意義，一般以分離培養進(jìn)行鑒定。肺炎支原體和解脲脲原體分離培養需10d以上才能長(cháng)出菌落，有時(shí)需20d或更長(cháng)，不適合臨床快速診斷。PCR結合核酸雜交試驗與序列分析，可以敏感、快速診斷各類(lèi)支原體感染。

 

 

     5、衣原體感染的檢查

 

 

     衣原體（chlamydia）是一類(lèi)專(zhuān)性細胞內寄生的原核細胞型微生物，主要包括沙眼衣原體、鸚鵡熱衣原體、肺炎衣原體。涂片檢查可在被感染細胞的細胞質(zhì)內查到包涵體，具有一定的診斷價(jià)值。免疫熒光染色檢查被感染細胞內的衣原體抗原，可以快速診斷衣原體感染和分型。

 

     6、立克次體感染的檢查 

 

    立克次體（rickettsia）是一類(lèi)微小的桿狀或球桿狀的、除極少數外僅在宿主細胞內繁殖的微生物。免疫熒光染色可檢查被感染組織標本中的立克次體抗原，PCR擴增產(chǎn)物分析可以敏感、早期診斷立克次體感染。