細菌培養檢測技術(shù)（1）

　細菌的培養技術(shù)是微生物實(shí)驗中基本技術(shù)之一。大多數細菌均可用人工方法培養，只有將細菌培養出來(lái)才能對它進(jìn)行研究和鑒定
　　一.培養基的種類(lèi)
　　培養基（culture medium）是細菌生長(cháng)繁殖所需要的各種營(yíng)養物質(zhì)的人工制品。適宜的培養基能使細菌在體外迅速生長(cháng)繁殖，便于對細菌進(jìn)行分離和鑒別�？煞譃榛�礎培養基、營(yíng)養培養基、選擇培養基、鑒別培養基、厭氧菌用培養基和特殊培養基。
　�。ㄒ唬┗�礎培養基
　　只含有細菌生長(cháng)所需的最基本營(yíng)養成分，應用最廣泛，為制備多種培養基的基礎，常見(jiàn)的有肉湯培養基、瓊脂培養基。
　�。ǘ�）營(yíng)養培養基
　　在基礎培養基中加入葡萄糖、血液、血清、腹水或酵母浸膏等有機物，可供營(yíng)養要求較高的細菌生長(cháng)需要或增菌用。如結核分枝桿菌培養基中添加雞蛋、馬鈴薯、甘油等。
　�。ㄈ�）選擇培養基
　　利用不同種類(lèi)細菌對化學(xué)物質(zhì)的敏感性不同而制成，使分離菌大量繁殖而抑制其它細菌生長(cháng)的培養基。培養基中含有的抑制劑能抑制非目的菌生長(cháng)或使其生長(cháng)不佳，有利于目的菌的檢出和識別。選擇培養基多為固體平板，用于從標本中分離某些特定的細菌。
　�。ㄋ模╄b別培養基
　　培養基中加有某些特定成分，如糖、醇類(lèi)和指示劑等，用于檢查細菌的各種生化反應，以資鑒別和鑒定細菌。
　�。ㄎ澹﹨捬蹙�用培養基
　　專(zhuān)性厭氧菌須在無(wú)氧條件下才能生長(cháng)，故需在培養基中加入半胱氨酸、硫乙醇酸鈉等還原劑，降低培養基中氧化還原電勢，并應與外界空氣隔絕，使培養基本身為無(wú)氧的環(huán)境。
　�。�六）特殊培養基
　　為某些需要在特殊條件下才能生長(cháng)的細菌培養之用。如高滲鹽增菌培養基、高滲糖增菌培養基、改良 Kagan氏培養基等。
　　二.培養基的制備
　　制備一般培養基的主要過(guò)程基本相似，包括調配、溶化、調整 pH、過(guò)濾、分裝、滅菌及檢定和保存。
　　三.細菌檢驗室的注意事項及無(wú)菌技術(shù)
　　細菌培養必須隨時(shí)為防止污染和病原菌的擴散而進(jìn)行操作，即無(wú)菌操作。細菌檢驗室的注意事項如下：
　　1．細菌的培養應在接種罩或無(wú)菌室內進(jìn)行。有條件的實(shí)驗室可在超凈工作臺內進(jìn)行。
　　2．用接種環(huán)分離和移種細菌時(shí)，用前用后均需滅菌處理。一般采用火焰滅菌法。
　　3．從培養瓶或試管培養物中取標本或移種時(shí)，在打開(kāi)瓶口、管口或關(guān)閉前，均要在火焰上通過(guò)2～3次。切不可將含菌材料污染臺面和其他物體。
　　4．如不慎將試管等打破造成菌液污染時(shí)，不要驚慌，應立即報告負責人，然后用3％來(lái)蘇或5％石炭酸處理污染臺面或地面，至少浸泡30分種。
　　5．工作完畢后，用紫外光燈照射30分鐘，或用3％來(lái)蘇擦拭臺面，并清洗雙手。
　　 四、接種環(huán)和接種針使用
　　接種環(huán)和接種針由三部分組成，即環(huán)（針）部分、金屬柄部分和絕熱柄部分。接種環(huán)和接種針通常選用電熱（鎳）絲，環(huán)的直徑隨使用目的而不同，一般多為2～4mm，環(huán)和針的長(cháng)度為40～50mm。
　　接種環(huán)（針）使用前后均應進(jìn)行滅菌處理，將接種環(huán)（針）末端直立火焰中，燒紅鎳絲部分，再使接種環(huán)（針）金屬柄旋轉通過(guò)火焰3次滅菌，冷卻后用以取菌或待試標本。使用接種環(huán)（針）完畢后立即將染菌的鎳絲部分于還原焰（內焰）中加熱，烤干環(huán)（針）端附著(zhù)的細菌或標本，以免環(huán)（針）上殘余的細菌或標本因突受高熱，爆烈四濺，而污染環(huán)境和導致傳染危險。然后再移于氧化焰（外焰）中燒紅滅菌，最后將金屬柄部分往復在火焰中通過(guò)3次。用完后的接種環(huán)（針），應立即擱置于架上，切勿隨手棄置，以免灼焦臺面或其他物件。