支原體培養檢驗操作程序

 

一、接收標本：標本與檢驗單查對正確，標本質(zhì)量合格。

 

二、標本處理：接種Uu、Mh培養藥敏一體試劑盒：操作前將所需試劑取出置室溫30分鐘。1、A排第一孔加入培養液100μL作為陰性對照；2、將標本拭子直接放入培養液中充分振蕩并在瓶壁擠干拭子，若為男性尿液取離心沉淀物150μL或陽(yáng)性標本取50μL于培養液中混勻。3、將混有標本的培養液各100μL加入A排余下及B排各孔中；4、各孔加礦物油覆蓋，置于37℃溫箱培養。  

 

第24、48小時(shí)分別觀(guān)察記錄結果。結果判斷原理：培養基含有相應支原體生長(cháng)所需的蛋白質(zhì)、馬血清、生長(cháng)因子、底物及酚紅指示劑，當有支原體生長(cháng)時(shí)，底物被分解，使PH值升高，培養基由橙黃色變成紅色，且清亮為陽(yáng)性。培養基不變色為陰性。B1孔陽(yáng)性為解脲支原體陽(yáng)性；B2孔陽(yáng)性為人型支原體陽(yáng)性。藥敏孔A排為高濃度，B排為低濃度，變紅則耐藥，不變紅示敏感而不生長(cháng)。當高濃度與低濃度兩孔均不生長(cháng)(不變色)為該藥敏感；高濃度不變色低濃度變紅為該藥物中介；高濃度與低濃度均變紅為該藥物耐藥。

 

結果一：第24 小時(shí)B1孔由橙黃色變成紅色示解脲支原體陽(yáng)性，藥敏看結果判斷；第24小時(shí)、48小時(shí)觀(guān)察B2孔均不變色，示無(wú)人型支原體生長(cháng)或濃度極低，報告培養出解脲支原體，未培養出人型支原體。

 

結果二：第24 小時(shí)B1孔不變色示解脲支原體陰性；第48小時(shí)觀(guān)察B2孔由橙黃色變成紅色示人型支原體陽(yáng)性，藥敏看結果判斷。報告未培養出解脲支原體，培養出人型支原體附藥敏結果。

 

結果三：第24 小時(shí)B1孔由橙黃色變成紅色示解脲支原體陽(yáng)性，藥敏看結果判斷；第48小時(shí)觀(guān)察B2孔由橙黃色變成紅色示人型支原體陽(yáng)性，藥敏看結果判斷，報告培養出解脲支原體與人型支原體附藥敏結果。

 

結果四：陽(yáng)性對照孔由橙黃色變成紅色示支原體陽(yáng)性，藥敏看結果判斷；第24小時(shí)、48小時(shí)觀(guān)察B1孔、B2孔均不變色，示無(wú)解脲、人型支原體生長(cháng)或濃度極低，報告培養出非解脲、人型支原體或囑病人重留標本復查。

 

結果五：第24、48小時(shí)觀(guān)察B1孔、B2孔均不變色，示無(wú)支原體生長(cháng)或濃度極低，報告未培養出解脲及人型支原體。