不常見(jiàn)革蘭陽(yáng)性菌的快速鑒定方法

病原學(xué)檢測對于感染性疾病的診斷和治療非常重要，因此，臨床微生物實(shí)驗室在醫院感染治療和控制中起到關(guān)鍵作用。目前，大部分臨床微生物實(shí)驗室采用商品化的鑒定系統鑒定臨床分離的細菌，但是對于一些臨床不常見(jiàn)的細菌，傳統的鑒定方法(如革蘭染色、生化反應等)更加實(shí)用有效。因此，本文參照CLSI M32-A2文件列舉了一些臨床不常見(jiàn)細菌的特征和鑒定方法，希望對臨床微生物實(shí)驗室的常規工作有所幫助。

 

1．產(chǎn)單核李斯特菌李斯特菌是一種典型的胞內寄生的革蘭陽(yáng)性短桿菌，共分為2個(gè)群，7個(gè)種。第一群包括產(chǎn)單核細胞李斯特菌、伊氏李斯特菌、無(wú)害李斯特菌(又名英洛克李斯特菌) 、韋氏李斯特菌及西爾李斯特菌；第二群為較少見(jiàn)的格氏李斯特菌和莫氏李斯特菌。其中產(chǎn)單核細胞李斯特菌和伊氏李斯特菌具有致病性，且產(chǎn)單核細胞李斯特菌是惟一能引起人類(lèi)疾病的，是一種人獸共患病的病原菌，能引起人、畜的李斯特菌病，感染后主要表現為敗血癥、腦膜炎、流產(chǎn)和單核細胞增多。這種病菌在自然界廣泛存在，食品中存在的產(chǎn)單核細胞李斯特菌對人類(lèi)的安全具有危險，世界衛生組織(WHO)指出，水產(chǎn)品、奶及奶制品、肉制品均有不同程度的污染，并曾將其列為20世紀90年代食品中四大致病菌之一。

產(chǎn)單核李斯特菌是一種革蘭陽(yáng)性短小桿菌，通常成雙排列，偶爾可見(jiàn)雙球狀(見(jiàn)圖8)。有鞭毛，但僅在18~20℃有動(dòng)力，在37℃動(dòng)力緩慢。無(wú)芽胞，一般不形成莢膜，但在含有血清的葡萄糖蛋白胨水中能形成粘多糖莢膜。兼性厭氧，對營(yíng)養要求不高，普通培養基上可生長(cháng)，在血平板上會(huì )形成β-溶血。最適的生長(cháng)溫度是30~37℃，并可在4℃條件下進(jìn)行冷增菌。本菌耐堿不耐酸，對熱較為敏感，加熱50℃10min即可死亡同時(shí)該菌對多種抗生素敏感，以氨芐青霉素為首選，尚有青霉素、鏈霉素、四環(huán)素、氯霉素和紅霉素等敏感。但該菌對磺胺、桿菌肽和多粘菌素耐藥。產(chǎn)單核李斯特菌觸酶陽(yáng)性，馬尿酸鹽陽(yáng)性。

 

 

 

 2．鏈球菌屬

鏈球菌屬細菌廣泛分布于自然界、人和動(dòng)物腸道、健康人鼻咽部等，致病鏈球菌可引起各種化膿性炎癥、猩紅熱、風(fēng)濕熱等疾病。本屬細菌為革蘭陽(yáng)性球菌，鏈狀排列，無(wú)鞭毛，無(wú)芽孢，可形成莢膜，在液體培養基中易形成長(cháng)鏈，致病性強的菌株多為長(cháng)鏈，在膿汁標本中多為短鏈。本屬細菌為需氧或兼性厭氧菌，部分為厭氧菌。營(yíng)養要求較高，需在加有血液、血清等成分的培養基生長(cháng)良好。根據鏈球菌在血液瓊脂平板上菌落周?chē)�溶血情況，有草綠色溶血環(huán)的稱(chēng)為α型溶血，如草綠色鏈球菌；呈透明溶血環(huán)的稱(chēng)為β型溶血，稱(chēng)β溶血性鏈球菌或化膿性鏈球菌；也有不溶血的，稱(chēng)為γ型溶血，如腸球菌。根據族特異性抗原將鏈球菌分A－T 18個(gè)族。鏈球菌屬細菌觸酶陰性�；�膿鏈球菌(A群) PYR陽(yáng)性。無(wú)乳鏈球菌(B群) 馬尿酸鹽陽(yáng)性，CAMP陽(yáng)性。草綠色鏈球菌PYR陰性，LAP陽(yáng)性，膽汁溶菌試驗陰性。肺炎鏈球菌鏡下為革蘭陽(yáng)性球菌，矛尖狀，成雙排列，在人和動(dòng)物體內形成莢膜，菌落細小、周?chē)�有草綠色溶血環(huán)，48小時(shí)后，由于菌落自溶，呈現“臍窩狀”，Optochin敏感試驗陽(yáng)性，膽汁溶菌試驗陽(yáng)性，菊糖分解試驗陽(yáng)性。

 

 

表2 不常見(jiàn)革蘭陽(yáng)性菌快速鑒定方法