微生物生長(cháng)的幾種檢測方法（2）

生長(cháng)量測定法

 

　　體積測量法：又稱(chēng)測菌絲濃度法。

 

　　通過(guò)測定一定體積培養液中所含菌絲的量來(lái)反映微生物的生長(cháng)狀況。方法是，取一定量的待測培養液（如10毫升）放在有刻度的離心管中，設定一定的離心時(shí)間（如5分鐘）和轉速（如5000 rpm），離心后，倒出上清夜，測出上清夜體積為v，則菌絲濃度為（10-v）/10。菌絲濃度測定法是大規模工業(yè)發(fā)酵生產(chǎn)上微生物生長(cháng)的一個(gè)重要監測指標。這種方法比較粗放，簡(jiǎn)便，快速，但需要設定一致的處理條件，否則偏差很大，由于離心沉淀物中夾雜有一些固體營(yíng)養物，結果會(huì )有一定偏差。

 

　　稱(chēng)干重法：

 

　　可用離心或過(guò)濾法測定。一般干重為濕重的10-20%。在離心法中，將一定體積待測培養液倒入離心管中，設定一定的離心時(shí)間和轉速，進(jìn)行離心，并用清水離心洗滌1-5次，進(jìn)行干燥。干燥可用烘箱在105℃或100℃下烘干，或采用紅外線(xiàn)烘干，也可在80℃或40℃下真空干燥，干燥后稱(chēng)重。如用過(guò)濾法，絲狀真菌可用濾紙過(guò)濾，細菌可用醋酸纖維膜等濾膜過(guò)濾，過(guò)濾后用少量水洗滌，在40℃下進(jìn)行真空干燥。稱(chēng)干重發(fā)法較為煩瑣，通常獲取的微生物產(chǎn)品為菌體時(shí)，常采用這種方法，如活性干酵母（activity  dry  yeast, ADY）,一些以微生物菌體為活性物質(zhì)的飼料和肥料。

 

　比濁法：

 

　　微生物的生長(cháng)引起培養物混濁度的增高。通過(guò)紫外分光光度計測定一定波長(cháng)下的吸光值，判斷微生物的生長(cháng)狀況。對某一培養物內的菌體生長(cháng)作定時(shí)跟蹤時(shí)，可采用一種特制的有側臂的三角燒瓶。將側臂插入光電比色計的比色座孔中，即可隨時(shí)測定其生長(cháng)情況，而不必取菌液。該法主要用于發(fā)酵工業(yè)菌體生長(cháng)監測。如我所使用UNICO公司的紫外-可見(jiàn)分光光度計，在波長(cháng)600nm 處用比色管定時(shí)測定發(fā)酵液的吸光光度值OD600，以此監控E.Coli的生長(cháng)及誘導時(shí)間。