談厭氧菌檢驗的重要性及注意事項

[摘要] 目的：研究厭氧菌檢驗的重要性及注意事項。方法：結合臨床經(jīng)驗，回顧性闡述厭氧菌檢驗的注意事項。結果：厭氧菌在感染性疾病中的致病作用日益受到臨床重視。臨床感染的很多實(shí)例證明開(kāi)展厭氧菌檢驗極為必要。結論：不同地區和不同醫院厭氧菌的耐藥譜不同，經(jīng)驗用藥時(shí)要根據本地區和本實(shí)驗室的藥敏譜選藥。因此，為提高療效，減少抗生素的毒副作用，最好根據藥敏試驗選擇藥物治療。

 

    [關(guān)鍵詞] 厭氧菌；無(wú)氧；培養；檢驗

 

       厭氧菌是一類(lèi)在無(wú)氧條件下比在有氧環(huán)境中生長(cháng)好的細菌，這類(lèi)細菌缺乏完整的代謝酶體系，其能量代謝以無(wú)氧發(fā)酵的方式進(jìn)行。它能引起人體不同部位的感染，包括闌尾炎、膽囊炎、中耳炎、口腔感染、心內膜炎、子宮內膜炎、腦膿腫、心肌壞死、骨髓炎、腹膜炎、膿胸、輸卵管炎、膿毒性關(guān)節炎、肝膿腫、鼻竇炎、腸道手術(shù)或創(chuàng )傷后傷口感染、盆腔炎以及菌血癥等。厭氧菌在感染性疾病中的致病作用日益受到臨床重視，臨床感染的很多實(shí)例證明開(kāi)展厭氧菌檢驗極為必要。

 

    1 厭氧菌檢驗概況

 

    過(guò)去我國厭氧菌培養在實(shí)驗室檢驗中開(kāi)展的并不理想，臨床醫生重視程度不夠，大多數實(shí)驗室沒(méi)有將厭氧菌培養作為常規檢驗開(kāi)展，加上厭氧菌培養方法學(xué)落后，且受培養基的配制和保存的限制，制約了厭氧菌培養在實(shí)驗室中的正常開(kāi)展，造成厭氧菌的漏檢率很高。據報道[1]，我國從未開(kāi)展過(guò)厭氧菌培養的實(shí)驗室占77%之多，有90%的實(shí)驗室沒(méi)有鑒定厭氧菌的設備，幾乎所有臨床細菌室均不開(kāi)展厭氧菌藥敏試驗。近年來(lái)，國內從臨床感染病例中分離出厭氧菌的報道日益增多，臨床醫生已認識到厭氧菌在感染性疾病中的重要性，并能識別厭氧菌的重要特征，能認真、正確地采樣、送檢，且隨著(zhù)厭氧菌培養技術(shù)的不斷進(jìn)步，厭氧菌檢驗已成為臨床細菌學(xué)檢驗的重要組成部分。為提高感染性疾病的病原學(xué)診斷水平，開(kāi)展厭氧菌培養是非常必要的。據資料顯示，如僅做需氧菌培養，在23份漏檢標本中檢出9株厭氧菌，這說(shuō)明在做細菌需氧菌培養的同時(shí)應做厭氧菌培養[2]，否則將會(huì )造成大量病原菌漏檢，它不僅關(guān)系到疾病診斷的正確性，且影響治療效果或導致治療不徹底。

 

    2 厭氧菌檢驗的注意事項

 

    2.1 標本選擇

 

    根據厭氧菌感染的臨床特征，選擇感染局部有氣體產(chǎn)生，排出物有惡臭、帶血、呈黑色或黃綠色，與腫瘤有關(guān)的感染，病程呈亞急性或慢性，發(fā)生在肛周、口腔、鼻竇、咽頰等部位的感染，長(cháng)期使用氨基糖苷類(lèi)抗生素無(wú)效者和應用甲硝唑及替硝唑治療有效者。

 

    2.2 標本送檢

 

    大氣中的氧對厭氧菌有毒性作用，任何標本建議采用床邊接種的方法，床邊接種既能縮短標本接觸空氣的時(shí)間，又能較好地把好標本的質(zhì)量關(guān)。不在床邊接種的標本必須立即放入輸送培養基中并馬上送檢。

 

    2.3 檢驗人員的責任心

 

    檢驗人員對厭氧菌標本要加倍重視，積極配合臨床，主動(dòng)到床邊采集標本。厭氧菌培養成敗的關(guān)鍵在一個(gè)快字，標本采集后要馬上接種并放置于厭氧環(huán)境，對厭氧菌培養標本要做到標本到手后馬上處理。厭氧菌生長(cháng)物特別惡臭，所以觀(guān)察結果時(shí)檢驗人員要不怕臭，仔細觀(guān)察，多挑選可疑菌落做耐氧試驗，這樣才能成功地分離出厭氧菌。

 

    2.4 標本涂片檢查

 

    在對標本做厭氧菌培養的同時(shí)進(jìn)行涂片鏡檢，可早期把有厭氧菌生長(cháng)的信息提供給臨床，如普通需氧培養無(wú)細菌生長(cháng)，但直接涂片見(jiàn)到大量細菌者，即可考慮為厭氧菌感染；如普通培養只有一種細菌生長(cháng)但直接涂片可見(jiàn)2種或2種以上細菌者，可考慮患者為混合感染，這樣可早期指導臨床診斷，避免盲目用藥造成耐藥菌株產(chǎn)生，又可解決厭氧菌培養和藥敏周期長(cháng)的弊端。

 

    2.5 培養基的選擇和培養環(huán)境

 

    初代接種厭氧菌最好使用新鮮配制的培養基，還可適當選用一些選擇培養基，培養基使用前須進(jìn)行預還原。培養環(huán)境選用厭氧袋或厭氧罐，兩種方法價(jià)廉且操作簡(jiǎn)易；厭氧箱設備昂貴，操作復雜，不利于臨床實(shí)驗室的使用。目前，厭氧菌培養用OxyplatesTM培養法較好[3]，它無(wú)需其他厭氧裝置，它的劃線(xiàn)和培養在一個(gè)標準的厭氧培養基中，且能被反復打開(kāi)使用多次，無(wú)須預先還原，便于實(shí)驗室的使用，這種培養方法省去了厭氧罐、厭氧袋、厭氧箱等復雜、昂貴的消耗品，又能較好地分離出厭氧菌。

 

    厭氧菌的鑒定可選用API 20A、VITEK-ANI、MICRO-01D、氣液色譜儀等設備鑒定。厭氧菌的藥敏試驗，大部分實(shí)驗室采用美國臨床實(shí)驗室標準化委員會(huì )(NCCLS)推薦的瓊脂稀釋法[4]，該方法實(shí)用性強，適用于大量菌株的測定，有的實(shí)驗室使用濃度梯度法(Etest)或ATB-ANA試條的方法，操作簡(jiǎn)便、快速。

 

    3 厭氧菌感染的治療

 

厭氧菌感染的治療除針對原發(fā)病外，抗厭氧菌的治療最為重要。替硝唑和甲硝唑對大多數厭氧菌感染治療有效，故成為目前臨床上抗厭氧菌的首選藥物。由于多數厭氧菌感染是混合感染，聯(lián)合使用抗厭氧菌和需氧菌藥物是非常必要的。由于不同地區和不同醫院厭氧菌的耐藥譜不同，經(jīng)驗用藥時(shí)要根據本地區和本實(shí)驗室的藥敏譜選藥。因此，為提高療效，減少抗生素的毒副作用，最好根據藥敏試驗選擇藥物治療。

作者：徐靜媛《醫學(xué)檢驗》

 

    [參考文獻]

 

    [1]張秀珍.要加強我國臨床細菌室厭氧菌的培養技術(shù)[J].中華檢驗醫學(xué)雜志,2002,25(3):133-134.

    [2]儲從家,孔繁林,羅次節,等.同時(shí)做需氧厭氧培養提高血(體)液細菌培養陽(yáng)性率[J].中華檢驗醫學(xué)雜志,2002,23(5):285.

    [3]吳多榮.氧凈(OxyplatesTM)厭氧菌培養法的實(shí)驗室應用[J].中國熱帶醫學(xué),2004,4(4):617-619.