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    志賀氏菌屬檢驗的標準操作程序



    錄入時(shí)間:2011-5-11 10:17:18 來(lái)源:互聯(lián)網(wǎng)

    目的
        指導檢驗傷寒、副傷寒沙門(mén)氏菌。
    該SOP變動(dòng)程序
        本標準操作程序的改動(dòng),可由任一使用本SOP的工作人員提出,并報經(jīng)下述人員批準簽字:專(zhuān)業(yè)主管、科主任。
    【標本的采集】
        由受檢者將采便用已蘸有甘油鹽水的棉棒自行插入肛門(mén)內,輕輕轉動(dòng),然后取出,插入帶有編號的塑料試管中,交給檢驗科人員。
    【檢驗程序】
        采便→立即劃線(xiàn)接種SS平板→培養后挑取可疑菌落接種三糖鐵斜面及半固體培養基→生化學(xué)試驗→血清學(xué)試驗→報告檢驗結果。
    【操作步驟】
        1.      分離培養
    采便后立即用采便棒劃線(xiàn)接種SS瓊脂平板。36±1℃培養18-24小時(shí),挑取無(wú)色半透明的光滑菌落分解乳糖或遲緩分解乳糖的光滑菌落,接種三糖鐵斜面及半固體,36±1℃培養18-24小時(shí)。
         2.      生化學(xué)試驗
    凡是三糖鐵反應符合志賀氏菌屬特征者(斜面產(chǎn)堿或不變色,底層產(chǎn)酸,H2S(—),產(chǎn)氣(—),但福氏6型產(chǎn)生少量氣體)、無(wú)動(dòng)力、革蘭氏陰性桿菌、作V-P試驗,苯丙氨酸,賴(lài)氨酸,檸檬酸鹽,葡萄糖銨試驗。其結果全部陰性者,作血清學(xué)試驗。
        3.      血清學(xué)試驗
    挑取三糖鐵斜面上的培養物
        福氏菌的鑒定:凡是與福氏多價(jià)血清凝集的菌株,可先用3、4,群6,群7,三種因子血清檢查,根據群因子血清反應結果,再用型因子血清檢查。福氏菌抗原成分如下
     
        福氏志賀氏各菌型與五型抗原成份
    型抗原
    群抗原
    在群因子血清中的凝集反應
    3、4
    6
    7、8
    a
    I
    1,2,4,5,9………
    +
    -
    -
    b
    I
    1,2,4,5,6,9……
    +
    +
    -
    2a
    1,3,4………
    +
    -
    -
    2b
    1,7,8,9……
    -
    -
    +
    3a
    1(3,4),6,7,8,9…
    (+)
    +
    +
    3b
    1,(3,4),6……
    (+)
    +
    -
    4a
    1,3,4………
    +
    -
    -
    4b
    1,3,4,6………
    +
    +
    -
    5a
    1,3,4………
    +
    -
    -
    5b
    1,5,7,9………
    -
    -
    +
    6
    1,2,(4)………
    (+)
    -
    -
    變種
    1,7,8,9………
    -
    -
    +
    變種
    1,3,4………
    +
    -
    -
    (。﹥鹊目乖赡懿淮嬖。
        4.      菌型的判定和結果的報告 
        根據生化學(xué)試驗和血清學(xué)分型試驗結果,判定菌型,報告結果。
    【質(zhì)量控制要求】
       1.      增菌及分離必須保證一個(gè)一支增菌管,一塊平板,禁止多人一管,多人一塊平板。
       2.      分離平板時(shí)平板一半以上應有孤立菌落,以供挑選。

     

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